[发明专利]产大麻二酚的重组酿酒酵母、其构建方法以及应用

权利要求书

1.一种产大麻二酚的重组酿酒酵母，其特征在于，它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No .22040；

所述的产大麻二酚的重组酿酒酵母表达大麻二酚合成途径中的AAE1、CsPT4、OAC、OLS、CBDAS，并且所述的产大麻二酚的重组酿酒酵母异源表达tHMGR，及多拷贝表达AAE1与CBDAS基因；

所述CsPT4基因是密码子优化，且所述密码子优化的CsPT4序列如下：

AAGCTTATGGGTTTGTCCCTAGTATGCACCTTCTCTTTCCAAACTAACTACCACACTTTGCTAAACCCTCACAACAAGAACCCAAAGAACTCTTTATTGTCTTACCAACACCCAAAGACTCCAATTATAAAATCTTCCTACGATAACTTCCCATCTAAGTACTGTTTGACAAAGAATTTCCATTTGTTGGGTTTGAACTCCCACAACAGAATCTCTTCTCAATCCCGTTCCATCAGAGCTGGTTCCGACCAAATCGAAGGTTCTCCACATCACGAATCTGACAACAGTATTGCCACCAAAATCTTAAATTTCGGTCACACTTGTTGGAAATTGCAAAGACCATACGTTGTCAAGGGTATGATCTCTATTGCTTGTGGTTTGTTCGGTAGAGAATTATTCAACAACAGACACTTGTTTTCTTGGGGTTTGATGTGGAAGGCTTTCTTTGCTTTGGTCCCAATCTTGTCTTTCAACTTCTTCGCCGCTATCATGAACCAAATCTACGATGTTGACATTGACAGAATCAACAAGCCAGACTTGCCATTGGTTTCTGGTGAAATGTCTATTGAAACTGCTTGGATTCTTTCAATTATCGTTGCTTTGACCGGTTTGATTGTCACCATCAAGTTGAAGTCTGCCCCATTATTTGTCTTCATTTACATTTTCGGTATATTTGCCGGTTTCGCTTACTCTGTTCCACCAATCAGATGGAAGCAATACCCATTCACCAACTTCTTGATCACTATTTCATCTCACGTTGGTTTAGCCTTCACTTCTTATTCCGCTACCACCTCTGCTTTAGGTCTGCCTTTCGTCTGGAGACCAGCTTTCTCCTTCATTATTGCTTTCATGACTGTTATGGGTATGACCATCGCTTTCGCCAAGGATATCAGTGACATTGAAGGTGATGCTAAGTACGGTGTCTCCACCGTCGCTACTAAGTTAGGTGCTAGAAACATGACTTTCGTTGTTTCTGGCGTTTTGTTGTTGAATTACTTGGTTTCCATCTCCATTGGTATCATCTGGCCACAAGTTTTTAAGTCCAACATTATGATTTTGTCCCATGCCATCTTGGCTTTCTGTTTGATTTTCCAAACCCGTGAATTGGCTTTGGCCAACTATGCTTCTGCTCCATCCAGACAATTCTTCGAATTCATCTGGTTATTGTACTACGCTGAATACTTCGTCTACGTCTTTATCCTCGAG。

2.权利要求 1所述的产大麻二酚的重组酿酒酵母的一种应用，其特征在于，所述的产大麻二酚的重组酿酒酵母通过发酵生产大麻二酚。

3.根据权利要求2所述的产大麻二酚的重组酿酒酵母的应用，其特征在于，所述发酵的条件为pH=4-6，温度为30℃，用于发酵的培养基由20-30 g/L的葡萄糖、15-25g/L的胰蛋白胨、5-15g/L的酵母粉组成。

4.根据权利要求3所述的产大麻二酚的重组酿酒酵母的应用，其特征在于，所述培养基中葡萄糖耗尽后，采用半乳糖补料发酵。

5.根据权利要求4所述的产大麻二酚的重组酿酒酵母的应用，其特征在于，所述半乳糖补料方式为每隔24h流加半乳糖，使得半乳糖的浓度为20-30g/L，同时向培养基中添加1mM的己酸。