[发明专利]一种制备天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法

说明书

本发明属于海洋生物技术领域，涉及一种从水母中提取制备低分子量抗氧化活性肽的方法。一种制备天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法,包括：（1）将称量的水母匀浆绞碎；（2）在低温条件下离心收集上清液；（3）用膜截留分子量为3,000 Da的超滤管，将步骤（2）中制备的上清液在低温条件下离心收集滤出液；（4）将收集的滤出液冷冻干燥。本发明的方法，制备工艺简单；制备的水母肽抗氧化活性高；无生物和化学加工，天然无毒。

技术领域

本发明属于海洋生物技术领域，涉及一种从水母中提取制备低分子量抗氧化活性肽的方法。

背景技术

水母是海洋无脊椎动物，主要包括刺胞动物门的水螅水母、管水母、钵水母、立方水母以及栉水母门的栉水母五大类。全球水母种类约有1000余种，分布于全球各个水域里，资源十分丰富。尤其，近些年来，随着海洋生态环境以及人类活动等因素的影响，致使海洋中水母数量急剧增加，并造成一系列的危害，例如：渔业产量减少、发电厂堵塞、造成人类蜇伤等。我国水母资源非常丰富，从海南、广东、山东，一直到辽宁沿海均广泛分布。水母中含有大量结构新颖独特的生物活性物质，如活性酶、多肽等。而目前水母资源的利用仅是对少数几种水母经简单加工后，作为食品食用，附加值不高。

人体内活性氧自由基对机体产生很大的损伤作用，可造成酶失活、膜质过氧化，导致衰老、肿瘤、动脉粥样硬化等许多疾病的发生。因此，抗氧化剂的开发和利用对人的生命健康有很重要的作用。目前，抗氧化剂分两类，人工合成抗氧化剂和天然提取抗氧化剂。其中，人工合成的抗氧化剂，如二丁基羟基甲苯（BHT）、丁基羟基甲氧基（BHA）、丙二醇（PG）等具有较好的清除活性氧自由基的作用，常用作食品添加剂；但研究表明，BHT、BHA、PG也具有一定的毒副作用，不利于人体健康，因此人工合成抗氧化剂的使用受到严格限制。天然来源的抗氧化剂具有低毒等特点，所以，从自然届中筛选对人体安全、高效的天然抗氧化剂具有着重要的意义。研究发现，水母中具有大量的天然抗氧化活性物质。因此，从水母中提取制备天然抗氧化活性肽，实现水母变废为宝和水母资源的高值化利用，具有重要的社会意义和经济价值。

现有肽类的提取方法主要有两种，一种是化学法提取，一种是物理法提取。二者各有利弊，“化学提取法”主要是“化学酶反应提取法”。其反应快，生产量大，但缺点是提取出来的肽类活性较低，并且提取出的肽类产品中多少会残留蛋白酶，该法是市面上肽类产品的主要来源。“物理提取法”主要指“介质电容法活性肽提取技术”，其特点是反应慢，生产量小，但是生产出来的肽类具有很高的活性。

如何在保证肽类活性的前提下从水母中提取出天然无毒的活性肽，是实现水母资源的高值化利用过程中需要解决的技术问题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种制备天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法。

本发明解决其技术问题采用的技术方案为：一种制备天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法，包括：

（1）将称量的水母匀浆绞碎；

（2）在低温条件下离心收集上清液；

（3）用膜截留分子量为3,000 Da的超滤管，将步骤（2）中制备的上清液在低温条件下离心收集滤出液；

（4）将收集的滤出液冷冻干燥。

作为本发明的一种优选方式，步骤（1）中，在绞碎的水母中加入1-3倍的重量/体积比的磷酸缓冲液（PBS），2-6℃下超声破碎10-20 min。

进一步优选地，磷酸缓冲液为20-50 mM，pH6.0-8.0，含0.1-0.2M NaCl。

进一步优选地，步骤（2）中，转速10,000-12,000 rpm，离心10-30min。

进一步优选地，步骤（3）中，转速5,000-7,000 rpm离心30-60 min。

进一步优选地，所述的水母为新鲜水母或置于-80~-20℃的低温下保存的冷冻水母。