[发明专利]一种纳米诊疗剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种纳米诊疗剂，其特征在于，包括Cas9@MnMOF纳米颗粒、包覆在所述Cas9@MnMOF纳米颗粒表面的癌细胞膜；所述Cas9@MnMOF纳米颗粒由锰掺杂金属有机框架以及固化在所述锰掺杂金属有机框架中的Cas9-sgRNA组成，所述Cas9-sgRNA为一体化质粒，所述一体化质粒同时表达Cas9核酸酶和靶向PLK1的sgRNA。

2.根据权利要求1所述的纳米诊疗剂，其特征在于，所述癌细胞膜选自肺癌细胞膜、食管癌细胞膜、膀胱癌细胞膜、胰腺癌细胞膜、黑色素瘤细胞膜、宫颈癌细胞膜、乳腺癌细胞膜、卵巢癌细胞膜、子宫内膜癌细胞膜、肝癌细胞膜、肾癌细胞膜、鼻咽癌细胞膜、淋巴癌细胞膜、结直肠癌细胞膜、大肠癌细胞膜、胃癌细胞膜、头颈部肿瘤细胞膜、胶质瘤细胞膜、甲状腺癌细胞膜中的一种或多种。

3.一种纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，包括步骤：

提供Cas9@MnMOF纳米颗粒，所述Cas9@MnMOF纳米颗粒由锰掺杂金属有机框架以及固化在所述锰掺杂金属有机框架中的Cas9-sgRNA组成，所述Cas9-sgRNA为一体化质粒，所述一体化质粒同时表达Cas9核酸酶和靶向PLK1的sgRNA；

将所述Cas9@MnMOF纳米颗粒与癌细胞膜进行混合得到混合液，对所述混合液进行超声处理得到所述纳米诊疗剂。

4.根据权利要求3所述的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述Cas9@MnMOF纳米颗粒的制备包括步骤：

将Cas9-sgRNA与2-甲基咪唑溶于水中配成混合溶液A；

将水溶性锌盐和水溶性锰盐溶于水中配成混合溶液B；

将所述混合溶液A与所述混合溶液B混合，使锰离子、锌离子与2-甲基咪唑进行配位生成多孔杂化的锰掺杂金属有机框架，同时将Cas9-sgRNA固化在所述锰掺杂金属有机框架中，得到所述Cas9@MnMOF纳米颗粒。

5.根据权利要求3所述的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述癌细胞膜的制备包括步骤：

将癌细胞进行均质和梯度离心后取上清液得到癌细胞膜碎片；

将所述癌细胞膜碎片经过滤膜过滤后得到所述癌细胞膜。

6.根据权利要求5所述的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述癌细胞膜选自肺癌细胞膜、食管癌细胞膜、膀胱癌细胞膜、胰腺癌细胞膜、黑色素瘤细胞膜、宫颈癌细胞膜、乳腺癌细胞膜、卵巢癌细胞膜、子宫内膜癌细胞膜、肝癌细胞膜、肾癌细胞膜、鼻咽癌细胞膜、淋巴癌细胞膜、结直肠癌细胞膜、大肠癌细胞膜、胃癌细胞膜、头颈部肿瘤细胞膜、胶质瘤细胞膜、甲状腺癌细胞膜中的一种或多种。

7.根据权利要求5所述的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述癌细胞膜碎片经过所述滤膜的孔径依次为0.8μm、0.45μm、0.22μm。

8.根据权利要求4所述的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述Cas9-sgRNA的浓度为0.1-30μg/mL；所述2-甲基咪唑的浓度为0.1-1000mg/mL；所述水溶性锌盐的浓度为1-50mM，所述水溶性锰盐与所述水溶性锌盐的摩尔浓度比为0.01-1：1。

9.根据权利要求3所述的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述Cas9@MnMOF纳米颗粒与所述癌细胞膜的质量比为1：0.1-5。

10.一种纳米诊疗剂的应用，其特征在于，将权利要求1-2任一所述的纳米诊疗剂用于制备治疗肿瘤的药物。