[发明专利]带有对背景信号的补偿的均相免疫测定

说明书

允许补偿样品和试剂中固有的背景信号的均相免疫测定法。均相免疫测定法用于检测对称二甲基精氨酸(SDMA)在生物样品中的存在或量的用途。用于进行该测定法的试剂和试剂盒。

本申请是申请日为2016年2月19日、申请号为201680011235.8、发明名称为“带有对背景信号的补偿的均相免疫测定”的中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本公开大体上涉及允许补偿样品和试剂中固有的背景信号的均相免疫测定法。在特定实施方式中，本公开涉及均相免疫测定法用于检测对称二甲基精氨酸(SDMA)在生物样品中的存在或量的用途。

背景技术

均相免疫测定法已被实施用于测定各种分析物，最主要是用于药物滥用的分析物。SDMA已被鉴定为在生物样品中用作用于评估例如肾功能、心血管功能和SLE的标志物。与用于药物滥用的分析物相比，SDMA通常以相对低的浓度存在于生物样品中。

因此，发明人已确认了在本领域对于更精确和灵敏的均相免疫测定法的需要，特别是对于在生物样品中具有低浓度的分析物，诸如SDMA。

发明内容

在一个方面，本公开涉及对称二甲基精氨酸(SDMA)的轭合物(conjugates)，例如SDMA和酶的轭合物。在本公开的一个实例中，轭合物是与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)轭合的SDMA。在多个实施方式中，SDMA通过5至15个原子的连接子与酶轭合。类似地，SDMA可以是通过长度为约5-15埃连接子的酶。本公开的实例轭合物包括以下：

在另一方面，本公开涉及包括本公开的轭合物和对游离SDMA具有特异性的抗体的组合物。在多个实施方式中，对游离SDMA具有特异性的抗体对于不对称二甲基精氨酸(ADMA)的反应性低于其对游离SDMA的反应性的25％。类似地，抗体可以与一种或多种选自不对称二甲基精氨酸(ADMA)、L-精氨酸和N-甲基精氨酸的化合物没有或基本上没有交叉反应性。

在另一方面，本公开涉及包括本公开的轭合物和对SDMA具有特异性的抗体的试剂盒。

在多个方面，本公开的试剂盒包括用于在含有分析物的样品上进行测定的试剂。所述试剂盒可以包括以下组分：

(a)用于进行第一次测定的第一组试剂，包括：

i.包括抗分析物抗体和酶的信号产生底物的第一试剂，和

ii.包括分析物和所述酶的轭合物的第二试剂，和

(b)用于进行第二次测定的第二组试剂，包括

i.包括所述底物的第三试剂。

在所述试剂盒中，第二组试剂可进一步包括包含稀释剂和缓冲剂中的至少一种的第四试剂。所述第四试剂还可以包括所述轭合物或所述酶。此外，所述试剂盒中的至少一种试剂包括除所述轭合物的酶以外的酶的抑制剂。在一个实施方式中，第一试剂中轭合物的浓度比第四试剂中轭合物浓度高约5至约150倍。所述试剂盒还包括含有在已被去除所述分析物的样品溶液中稀释的已知量分析物的标准品。例如，已被去除分析物的样品溶液可以是经分离的血清(stripped serum)、经分离的血浆(stripped plasma)或预处理的样品。第一试剂和/或第二试剂还可以包括电子介体和染料，第三试剂和/或第四试剂可以进一步包括所述介体和所述染料，其中所述介体从所述底物接受电子并将其转移到所述染料。

此外，本公开涉及包括本公开试剂盒的组分和疑似含有SDMA的样品的反应混合物。