[发明专利]用于检测HIV感染者免疫重建状况的试剂和方法

说明书

本发明提供了用于表达干扰素刺激基因(Interferon stimulatedgenes)IFI27和IFI6的引物组、探针、试剂盒、以及其用于评价艾滋病感染者免疫重建状况的用途。

技术领域

本发明涉及艾滋病(HIV)感染者免疫重建状况的检测领域，具体地涉及一种用于表达干扰素刺激基因IFI27和/或IFI6的引物组、探针、试剂盒及其用于检测HIV感染者免疫重建状况的应用。

背景技术

艾滋病的抗病毒治疗能够有效抑制病毒复制，但仍有20％-30％经治疗的感染者不能实现有效的免疫重建，尽管HIV病毒载量得到了有效的控制，但CD4⁺T淋巴细胞一直处于较低的水平，这些感染者被称为“免疫不应答者”。这些感染者“非AIDS相关疾病”的发病率和病死率远高于免疫应答的患者。目前，国内外未有对HIV感染者的免疫重建状况进行早期评价的成熟方法。

在现有技术中，病毒载量和CD4⁺T细胞这两个临床用于评价治疗效果的常规指标不适于评价HIV感染者的免疫重建状况。一方面，由于参与改善免疫重建水平临床治疗研究的HIV感染者都经历了长期抗病毒治疗，这些患者的病毒载量已经很低，不能用病毒载量来评价新型治疗方案的疗效。另一方面，临床评价病人免疫重建主要依赖CD4⁺T淋巴细胞的计数，但大多数HIV感染者在治疗后CD4⁺T细胞数目增长缓慢，短时间内难以看到CD4⁺T细胞的显著提高，通常治疗多年后才能获知病人免疫重建是否良好，以致延缓对病人进行CD4⁺T淋巴细胞重建的辅助性治疗，且长时间的观察会显著增加成本严重制约临床实验的开展。迄今为止，评价免疫不应答者的CD4⁺T细胞的重建水平尚无特异的临床检测指标和有效的临床检测工具。因此，亟需建立新型的评价免疫重建状况的手段。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测艾滋病感染者免疫重建状况的新手段。本申请的发明人将人源化动物模型和临床队列样本结合，通过流式细胞分选技术和RNA-seq技术筛选鉴定出与HIV临床疗效最为相关的干扰素刺激基因(Interferon stimulated genes，以下简称ISG)，并将其用作评价HIV感染者中非特异性免疫活化的指标，设计特异性引物组和探针，选择合适的内标，建立了临床适用的实时荧光定量PCR检测方法，为评价HIV感染者的免疫重建状况提供切实可行的新手段，由此得到本发明。

因此，在第一方面，本发明提供了针对干扰素刺激基因IFI27的引物组，包括：

IFI27上游引物：GGGAATCGCCTCGTCCTC(SEQ ID NO:1)，以及

IFI27下游引物：GTAGAACCTCGCAATGACAGC(SEQ ID NO:2)。

在第二方面，本发明提供了针对干扰素刺激基因IFI27的探针，包括：

IFI27探针：CCCAGTGACTGCAGAGTAGCCACA(SEQ ID NO:3)。

在第三方面，本发明提供了针对干扰素刺激基因IFI6的引物组，包括：

IFI6上游引物：TGATGAGCTGGTCTGCGA(SEQ ID NO:4)，以及

IFI6下游引物：ATCAGGGCACCAATATTACCTA(SEQ ID NO:5)。

在第四方面，本发明提供了针对干扰素刺激基因IFI6的探针，包括：

IFI6探针：CTGCCACCAGCCCCGAGG(SEQ ID NO:6)。

在第五方面，本发明提供了一种用于检测干扰素刺激基因IFI27和/或IFI6的表达水平的试剂盒，所述试剂盒包括：

-本发明第一方面和/或第三方面的引物组；以及