[发明专利]猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽及其应用有效
申请号: | 202110778929.7 | 申请日: | 2021-07-09 |
公开(公告)号: | CN113321711B | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
发明(设计)人: | 刘运超;陈玉梅;张改平;尚延丽;张腾;魏蔷;杨苏珍;王方雨 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室 |
主分类号: | C07K14/03 | 分类号: | C07K14/03;C07K16/08;C12N15/38;A61K39/245;A61P31/22 |
代理公司: | 郑州市华翔专利代理事务所(普通合伙) 41122 | 代理人: | 张爱军 |
地址: | 450000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 狂犬病毒 gd 蛋白 中和 抗原 多肽 及其 应用 | ||
本发明涉及一种猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽及其应用。所述多肽的氨基酸序列为:SGWPQPAEPFPPRTT;所述的表位多肽核心的氨基酸序列为:QPAEPFP;所述的核心氨基酸序列的关键氨基酸为羧基端苯丙氨酸F和脯氨酸P。本发明所得猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽,为PRV多肽疫苗和免疫评价试剂的开发提供了技术支持,对于PRV的防控具有重要意义。
技术领域
本发明涉及一种猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽及其应用,属于表位肽技术领域。
背景技术
伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的一种家畜和多种野生动物共患的烈性传染病。猪伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV),是有囊膜的双链DNA病毒,属于疱疹病毒目,疱疹病毒科甲亚科,水痘疱疹病毒属,猪疱疹病毒1型。PRV基因组中已经发现11种糖蛋白基因,参照疱疹病毒糖蛋白的命名方法将其统一命名为gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gL、gK、gM和gN。gB、gD、gH和gL是病毒囊膜与细胞膜融合的主要蛋白,其中gB、gC、gD是主要抗原蛋白。伪狂犬病毒感染新生仔猪发病率和死亡率在70-100%。1979年我国引入匈牙利的Bartha-K61基因缺失疫苗,至80年代末此疫苗在我国大范围推广,在以后的三十年中相对有效地控制了PRV的危害。但是,从2011年开始,PRV突变株在中国许多接种Bartha-K61疫苗的猪厂中爆发,PRV变异株感染的猪场中gE抗体阳性率高于50%,给我国养猪业带来巨大损失。
抗原表位是由连续氨基酸序列或不连续的氨基酸在三维结构中形成临近结构组成的分子结构,具有抗原性的特殊化学基团。病毒的抗原表位存在于病毒表面,决定了病毒的免疫原性。中和性抗原表位是一类能够诱发针对病毒的中和抗体的抗原表位,在诱发免疫保护、免疫评价和疫苗设计等方面发挥重要作用。目前,已经报道的猪伪狂犬病毒的中和性抗原表位主要集中在gB蛋白,本发明报道一种gD蛋白的中和性抗原表位及其在疫苗和免疫评价中的应用。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽及其应用。
为了实现上述目的,本发明所采用的技术方案是:
一种猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽,所述多肽的氨基酸序列为:SGWPQPAEPFPPRTT。
所述的表位多肽核心的氨基酸序列为:QPAEPFP。
所述的核心氨基酸序列的关键氨基酸为羧基端苯丙氨酸F和脯氨酸P。
编码所述猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽的多核苷酸。
所述的猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽在制备猪伪狂犬病毒多肽疫苗中的应用。
所述的猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽在猪伪狂犬病毒总抗体评价中的应用。
所述的猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽在猪伪狂犬病毒中和性抗体评价中的应用。
本发明有益效果:
本发明使用前期制备的稳定分泌抗PRV中和性抗体的杂交瘤细胞株7B6,利用合成多肽扫描技术,对杂交瘤细胞株7B6识别的抗原表位进行筛选,结果表明7B6细胞株识别的抗原表位位于PRV gD蛋白N端,氨基酸序列为312SGWPQPAEPFPPRTT326(SEQ ID NO.1所示)。
本发明所得猪伪狂犬病毒gD蛋白中和性抗原表位多肽,为PRV多肽疫苗和免疫评价试剂的开发提供了技术支持,对于PRV的防控具有重要意义。
附图说明
图1为实施例1gD蛋白的晶体结构图;
图2为实施例1gD蛋白截短片段的示意图;
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