[发明专利]一种枯草芽孢杆菌的培养方法及其应用

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌，所述枯草芽孢杆菌的拉丁名为Bacillus subtilisB-1166,为保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCCNo.61565的菌株。

2.一种如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

活化菌株；

制备种子液；

制备液体种子培养基，并在所述液体种子培养基中接种所述种子液，进行第一次发酵以及第一次泡沫处理后得到初级发酵液；

制备第一液体发酵培养基，并在所述第一液体发酵培养基中接种所述初级发酵液，进行第二次发酵以及第二次泡沫处理后得到二级发酵液；

制备第二液体发酵培养基，并在所述第二液体发酵培养基中接种所述二级发酵液，进行第三次发酵以及第三次泡沫处理后得到三级发酵液；

其中，所述所述液体种子培养基的组分包括：玉米浸渍液10g/L-15g/L、豆饼粉1g/L-3g/L、麸皮2g/L-4g/L、柠檬酸钠0.1g/L-0.4g/L、氯化钙0.01g/L-0.02g/L、磷酸氢二钾0.01g/L-0.30g/L、吐温0.01g/L-0.03g/L；

所述第一液体发酵培养基的组分包括：蛋白胨15g/L-25g/L、豆饼粉1g/L-3g/L、麸皮2g/L-5g/L、柠檬酸钠0.1g/L-0.5g/L、氯化钙0.1g/L-0.2g/L、蔗糖1g/L-5g/L、磷酸氢二钾0.2g/L-0.40g/L、吐温0.01g/L-0.03g/L；

所述第二液体发酵培养基为蛋白胨12g/L-20g/L、豆饼粉1g/L-3g/L、麸皮2g/L-4g/L、柠檬酸钠0.2g/L-0.5g/L、氯化钙0.2g/L-0.4g/L、蔗糖0.4g/-1g/L、无水硫酸镁0.01g/L-0.02g/L、磷酸二氢钾0.05g/L-0.20g/L；

其中，所述第一次泡沫处理为：完成第一次发酵后，控制发酵罐中搅拌装置的转速为45-65r/min，搅拌时间为1-3min；所述第二次泡沫处理为：完成第二次发酵后，控制发酵罐中搅拌装置的转速为45-65r/min，搅拌时间为1-3min；所述第三次泡沫处理为：完成第三次发酵后，控制发酵罐中搅拌装置的转速为45-65r/min，搅拌时间为1-3min。

3.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌的培养方法，其特征在于，所述活化菌株为：将枯草芽孢杆菌划线接种于LB固体培养基平板上，并在35℃-39℃活化培养18h-28h，制得活化菌株。

4.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌的培养方法，其特征在于，所述制备种子液为：将所述活化菌株接种于LB液体培养基中，在35℃-39℃、180-250r/min的条件下振荡培养18h-22h，制得种子液。