[发明专利]一种乳酸菌胞外多糖的制备方法在审
| 申请号： | 202110777841.3 | 申请日： | 2021-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN113308501A | 公开（公告）日： | 2021-08-27 |
| 发明（设计）人： | 张文齐;邵建宁;麻和平;刘彩云 | 申请（专利权）人： | 甘肃省科学院生物研究所 |
| 主分类号： | C12P19/04 | 分类号： | C12P19/04;C12N1/20;C08B37/00;C12R1/225;C12R1/245;C12R1/25 |
| 代理公司： | 西安合创非凡知识产权代理事务所(普通合伙) 61248 | 代理人： | 张翠华 |
| 地址： | 730000 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乳酸菌 多糖 制备 方法 | ||
1.一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、将活化后的乳酸菌置于添加有大豆小肽的MRS培养液，37℃，180rpm摇床培养 12h，得到乳酸菌发酵液；
S2、将乳酸菌发酵液以3～6％的接种量接种于添加有精胺、月光花素的MRS液体培养基中，调节初始pH值为5.5～7，于30～40℃下，培养8～15h，得粗乳酸菌胞外多糖；
S3、将粗乳酸菌胞外多糖经DEAE-52纤维素阴离子交换柱分离纯化，收集含有乳酸菌胞外粗多糖的第一洗脱峰的洗脱液，冷冻浓缩至5～6mL后，再经Sepharose CL-6B凝胶柱层析分离纯化，收集含有乳酸菌胞外粗多糖的第二洗脱峰的洗脱液，经截留分子量为290～350道尔顿的纳滤膜纳滤脱盐，再经截流分子量为3500Da的超滤管，以5000rpm的转速离心超滤15～60min，浓缩，90～95%的乙醇溶液沉淀，取沉淀物冷冻干燥，得到乳酸菌胞外纯多糖。
2.如权利要求1所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，MRS液体培养基的组成为：按重量百分比，碳源2％，氮源1％，磷酸氢二钾0.1～0.7％，牛肉膏1％，酵母粉0.45％，柠檬氢二胺0.3％，乙酸钠0.6％，硫酸镁0.068％，硫酸锰0.035％，大豆小肽 1～2％，蒸馏水余量；组成的MRS液体培养基的碳氮比为3:1～1:3。
3.如权利要求1所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，MRS液体培养基的组成为：按重量百分比，碳源2％，氮源1％，磷酸氢二钾0.1～0.7％，牛肉膏1％，酵母粉0.45％，柠檬氢二胺0.3％，乙酸钠0.6％，硫酸镁0.068％，硫酸锰0.035％，精胺 0.2～0.3％，月光花素 0.4～0.6％，蒸馏水余量；组成的MRS液体培养基的碳氮比为3:1～1:3。
4.如权利要求2或3所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于，所述的碳源为葡萄糖。
5.如权利要求2或3所述的一种乳酸菌胞外多糖的制备方法，其特征在于，所述的氮源为浓缩乳清蛋白。
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