[发明专利]模板-引物核酸分子、聚合酶活性测定方法及试剂盒

权利要求书

1.一种模板-引物核酸分子，其特征在于，所述模板-引物核酸分子包括模板链和引物链；所述模板链包括与引物链配对的模板配对区和单链区，所述单链区为多个重复单元组成的单链核苷酸序列，所述重复单元是长度为1～10bp的单链核苷酸序列，所述引物链的碱基序列为gcagagag，具体如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的模板-引物核酸分子，其特征在于，所述单链区的长度为30～70bp。

3.根据权利要求1所述的模板-引物核酸分子，其特征在于，所述重复单元为ac或cgt或gag或aagc或ccat或aagga或cgaac或tctcgc或cctctt或ctacgcaa或tagaaaaa或gccactgtat或atccttatct。

4.一种聚合酶活性测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备反应体系进行聚合酶的延伸反应，所述反应体系包括模板-引物核酸分子、待测聚合酶、底物和缓冲液；

(2)终止反应并加入双链DNA染料；

(3)检测反应体系中反应产物结合双链DNA染料产生的第一荧光强度；

(4)根据第二荧光强度与参照品的量的标准曲线，将第一荧光强度换算呈对应的参照品的量，以所述参照品的量表征所述待测聚合酶活性；

其中，所述参照品为由两条单链核苷酸序列完全互补配对形成的双链核酸分子，第二荧光强度为所述参照品结合双链DNA染料产生的荧光强度。

5.根据权利要求4所述的聚合酶活性测定方法，其特征在于，所述聚合酶延伸反应开始前还包括热启动步骤。

6.根据权利要求4所述的聚合酶活性测定方法，其特征在于，所述双链DNA染料为SybrGreen I或PicoGreen。

7.一种检测聚合酶活性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的模板-引物核酸分子。