[发明专利]一种彩叶芋的组织培养方法

权利要求书

1.一种彩叶芋的组织培养方法，其特征在于，包括以下操作步骤：

S1：外植体的选择与处理阶段：

S11：彩叶芋无菌建立材料可以选用叶片、叶柄和花序等，这里选择的是初抽生的卷成筒状的叶或刚展开的嫩叶，这两种外植体因为是新长出来的，所以携带的污染物比较少，可以降低污染率，此外，嫩叶的生长机能旺盛，在合适的培养基中生长良好；

S12：取彩叶芋嫩叶，用自来水冲洗干净，再放入洗洁精或洗衣服水中浸摇3min，用流动水冲洗干净，然后在超净台上，用75%的酒精溶液浸泡15s，再浸入0.1%升汞溶液5~6min，用无菌水冲洗5~7次，每次1min，沥干水分，将叶片切成6~8mm大小的切块；

S2：培养阶段：

S21：选用彩叶芋嫩叶作为外植体，放入初代培养基中培养，培养温度为25~28℃，光照1000~1500lx，光照10~12h/d，接种后11~14d，接种的叶片切片出现愈伤组织，培养15~18d后，可将得到的愈伤组织转接到增殖培养基中做继代培养；

S22：初代培养基中培养，培养温度为25~28℃，光照1000~1500lx，光照10~12h/d，接种后11~14d，接种的叶片切片出现愈伤组织接种到增殖培养基中进行增殖，培养温度为25~28℃，光照1500~2000lx，光照10~12h/d，经过40~60天后可转接；

S23：培养温度为25~28℃，光照1500~2000lx，光照10~12h/d，经过40~60天后增殖培养基中得到的愈伤组织接种到芽增殖培养基中进行芽诱导培养，培养温度为25~28℃，光照500~800lx，光照10~12h/d，此后外植体会产生大量的芽；

S24：培养温度为25~28℃，光照500~800lx，光照10~12h/d增殖培养基中得到的高为2~3cm的芽接种到生根培养基，在5~7天会长出根，待到幼苗长出2~3片叶子时即可出瓶进行移栽；

S3：炼苗移栽阶段：

当试管苗长出2~3片叶子，并生有较多的新根时，即可出瓶进行移栽，基质可采用经过灭菌处理的混合培养土，常用成分为细泥炭：珍珠岩：沙（1:0.2:0.3)，移栽前期，要将环境的空气湿度保持在80%~90%之间，遮光率为50%~60%，环境温度控制在22~25℃之间，在移栽过程中，附着在大苗基部的小苗无需去除，这样更利于成活，当移栽苗长大后，可在定植过程随之进行分株种植。

2.根据权利要求1所述一种彩叶芋的组织培养方法，其特征在于：所述初代培养基为：MS+6-BA2~4.00mg/L+NAA0.1~0.5mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶5g/L。

3.根据权利要求1所述一种彩叶芋的组织培养方法，其特征在于：所述增殖培养基为：MS+6-BA1.0~2.0mg/L+NAA0.1~0.4mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶5g/L。

4.根据权利要求1所述一种彩叶芋的组织培养方法，其特征在于：所述芽诱导培养基为：MS+6-BA2~4.00mg/L+NAA0.1~0.5mg/L+蔗糖15~20g/L+卡拉胶5g/L。

5.根据权利要求1所述一种彩叶芋的组织培养方法，其特征在于：所述生根培养基为：MS+NAA0.1~0.5mg/L+1%活性炭+蔗糖30g/L+卡拉胶5g/L。