[发明专利]一种快速鉴定日本对虾遗传性别的分子标记C27449及其应用有效
| 申请号： | 202110765290.9 | 申请日： | 2021-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN113502334B | 公开（公告）日： | 2023-05-02 |
| 发明（设计）人： | 兰伟康;吕建建;金玲;刘萍;李健 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人： | 王晓晓 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴定 日本 对虾 遗传性 别的 分子 标记 c27449 及其 应用 | ||
1.一种快速鉴定日本对虾遗传性别的分子标记C27449，其特征在于，所述分子标记C27449的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.用于检测权利要求1所述的分子标记C27449的引物对，其特征在于，所述引物对的核苷酸序列为：
C27449F：TCATCCAAGTTCCAGCCT；
C27449R：GGTCCCCCACAACATACA。
3.权利要求1所述的分子标记C27449在用于快速鉴定日本对虾遗传性别中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，利用所述分子标记C27449快速鉴定日本对虾遗传性别的步骤如下：
（1）合成核苷酸序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示的引物对C27449F和C27449R；
（2）提取日本对虾样本中的基因组DNA；
（3）以步骤（2）中提取的基因组DNA作为模板，利用引物对C27449F和C27449R进行PCR扩增反应，得到PCR扩增产物；
（4）对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，观察电泳结果；若电泳结果在120bp处出现扩增目的条带，则日本对虾为雌性，若电泳结果在120bp处无扩增目的条带出现，则日本对虾为雄性。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤（3）中PCR扩增反应的条件为94℃，3min；94℃，30s，55℃，30s，72℃，30s，重复32个循环；72℃，10min。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤（3）中PCR扩增反应的体系为：基因组DNA 1μL，Mix1 5.0μL，上下游引物各0.2μL，灭菌水补至10μL。
7.权利要求1所述的分子标记C27449在用于全雌或高雌性比日本对虾苗的育种中的应用。
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