[发明专利]一种含维生素B12

权利要求书

1.一种含维生素B₁₂酱油的酿造方法，其特征在于：包括下列步骤：

步骤1：将脱氮假单胞菌菌种接种到种子液体培养基中，培养60-80小时后补入无菌的糖蜜溶液，再培养6~7d，即得到脱氮假单胞菌种子液；

步骤2：将挤压处理后的豆粕放入蒸汽压力锅内蒸煮，在100KPa的压力下保持10～15分钟；然后卸去压力，将物料放凉至40±2℃，得到曲料；

步骤3：将曲料、米曲霉孢子粉和脱氮假单胞菌种子液按质量比100:1-5:1-10混合，将混合物料送入曲室曲池中，控制曲池中物料厚度25-35cm，曲室洁净度1万级，环境温度30-32℃，曲室通气量为每小时混合物料体积的10-30倍，每间隔45-90min翻动曲池一次；培养24-30h，得到成曲；

步骤4：将成曲粉碎，加入质量浓度为8-10%、温度50-60℃的食盐水，控制发酵温度40-42℃，保温发酵25-30d；然后控制发酵温度48-50℃，保温发酵6-10d，得到酱醅；向酱醅中添加食盐并搅拌，使酱醅食盐质量浓度大于或等于l5%，温度降到30～35℃，保温发酵14-16d，得到成熟酱醅；

步骤5：向成熟酱醅中注入温度85±1℃的纯化水或二油，浸泡18-20h，过滤后收集滤出液即为头油，滤渣即为头渣；头油过滤完成后，将预热至70-80℃的纯化水或三油，注入头渣浸泡8-12h，过滤收集滤出液即为二油，滤渣即为浸泡二渣；采用纯化水浸泡二渣1.5-2.5h，过滤后收集滤出液即为三油；将头油和二油混合，加热至80±0.5℃并保温10-20min，即得到含维生素B₁₂酱油。

2.根据权利要求1所述的含维生素B₁₂酱油的酿造方法，其特征在于：每升种子液体培养基含有：150-170g的甜菜糖蜜、4-6g的玉米浆、4-6g的磷酸氢二钾、0.01-0.03g的硫酸锌、4-6g的硫酸镁、0.1-0.3g的硫酸锰、35-45g的甜菜碱、0.015-0.035g的5,6-二甲基苯丙咪唑；制备方法包括：将原料混合均匀后调节pH至7.3-7.5；121℃高温杀菌15-20min，然后降温至室温。

3.根据权利要求1所述的含维生素B₁₂酱油的酿造方法，其特征在于：步骤1中，脱氮假单胞菌菌种的接种量为4-5%；培养条件为：，温度32±1℃，摇床转速180-220r/min；糖蜜溶液的质量浓度为25-30%。

4.根据权利要求1所述的含维生素B₁₂酱油的酿造方法，其特征在于：挤压处理后的豆粕的制备方法包括：将豆粕放入底部带有微气泡发生器的容器中，然后向容器中加入纯化水浸没豆粕；浸泡30-45min后开启微气泡发生器，气泡直径10-30μm、压力0.50-0.60MPa，通气量为每小时纯化水体积的150-300倍，气浮处理15-30min，期间不断除去被气泡浮起的颗粒杂质和浮油，直至没有颗粒杂质和浮油漂浮；取出豆粕，沥去水分后以均匀的速度加入到双螺杆挤压机中，控制喂料段温度60-70℃、挤压段温度80-85℃、计量段温度90-95℃、螺杆转速100-150r/min，进行挤压加工；收集挤压后物料即得挤压处理后的豆粕。