[发明专利]靶向人PD-L1单克隆抗体或其抗原结合片段及其应用

说明书

本发明公开了一种靶向人PD‑L1单克隆抗体或其抗原结合片段，单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，轻链可变区包含CDR1、CDR2和CDR3，轻链可变区的CDR1为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，轻链可变区的CDR2为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，轻链可变区的CDR3为SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；重链可变区包含CDR1、CDR2和CDR3，重链可变区的CDR1为SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列，重链可变区的CDR2为SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列，重链可变区的CDR3为SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列。本发明的抗体可应用于免疫治疗靶向单克隆药物的开发，亦可改造为scFv单链抗体等双特异类型抗体药物。

技术领域

本发明涉及噬菌体展示单克隆抗体技术领域，特别涉及靶向人PD-L1 单克隆抗体或其抗原结合片段及其应用。

背景技术

程序性细胞死亡蛋白-1(programmed death-1，PD-1)及其配体(PD-L1) 抑制剂是免疫治疗单抗药物重要靶点。PD-1主要在激活的T细胞和B细胞中表达，功能是抑制细胞的激活，这是免疫系统的一种正常的自稳机制，因为过度的T/B细胞激活会引起自身免疫病，所以PD-1是我们人体的一道护身符。但是，肿瘤微环境会诱导浸润的T细胞高表达PD-1分子，肿瘤细胞会高表达PD-1的配体PD-L1和PD-L2，导致肿瘤微环境中PD-1通路持续激活，T细胞功能被抑制，无法杀伤肿瘤细胞。PD-1的抗体可以阻断这一通路，部分恢复T细胞的功能，使这些细胞能够继续杀伤肿瘤细胞。PD-L1 在多种肿瘤细胞中均有上调表达，它与T细胞上的PD-1结合，抑制T细胞增殖和活化，使T细胞处于失活状态，最终诱导免疫逃逸。两种抑制剂均可阻断PD-1和PD-L1的结合，上调T细胞的生长和增殖，增强T细胞对肿瘤细胞的识别，激活其攻击和杀伤功能，通过调动人体自身的免疫功能实现抗肿瘤作用。

目前美国FDA批准的两款PD-1单克隆抗体药物Opdivo和Keytruda 在临床上用于黑色素瘤、非小细胞肺癌、尿路上皮癌等多种肿瘤。国内恒瑞医药、百济神州、信达生物等药企PD-1单抗药物也在今年陆续上市。但是，在本领域，更多更优的针对PD-1/PD-L1阻断抗体适用于不同适应症仍需要开发。

发明内容

本发明的目的是提供靶向人PD-L1单克隆抗体或其抗原结合片段及其应用，解决上述现有技术问题中的一个或者多个。

第一方面，本发明提供的靶向人PD-L1单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述轻链可变区包含 CDR1、CDR2和CDR3，所述轻链可变区的CDR1为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，所述轻链可变区的CDR2为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，所述轻链可变区的CDR3为SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；

所述重链可变区包含CDR1、CDR2和CDR3，所述重链可变区的CDR1 为SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列，所述重链可变区的CDR2为SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列，所述重链可变区的CDR3为SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列。

在某些实施方案中，轻链可变区序列由氨基酸序列SEQ ID NO.4组成。

在某些实施方案中，重链可变区序列由氨基酸序列SEQ ID NO.8组成。

在某些实施方案中，抗体为全抗体或scFv抗体。

在某些实施方案中，抗原结合片段为Fab形式或Fab2形式的抗原结合片段。

在某些实施方案中，抗体是鼠源化抗体、嵌合抗体或人源化抗体。

在某些实施方案中，抗人PD-L1单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：

S1、PD-L1重组蛋白表达和纯化；

S2、动物准备与免疫，免疫完成后采集脾脏；