[发明专利]一种针对牛奶中兽药及其代谢物的非靶向筛查方法

权利要求书

1.一种针对牛奶中兽药及其代谢物的非靶向筛查方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

(1)待测牛奶样本经预处理获得样品提取组分，利用超高效液相色谱-高分辨质谱联用分析提取物获得非靶向分析数据；

(2)风险化合物的筛选：对非靶向分析数据进行峰对齐和峰提取以获得原始化合物列表，扣除空白干扰后，经食品内源性组分过滤和质量亏损模型过滤筛选出风险化合物；

(3)数据库检索用于风险化合物定性，初步鉴定其中的兽药及其代谢物。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(1)中需使用直接有机溶剂提取的前处理方法将兽药等小分子组分从牛奶样本提取至提取剂中，提取剂为含体积浓度1–2％甲酸的乙腈，复溶剂为体积浓度20–50％的乙腈。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(1)中需使用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术的一级、二级质谱数据同时采集的方法对样本分析以获取原始谱学数据，包括保留时间、一级质谱和二级质谱信息。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(2)中获取化合物列表需依靠超高效液相色谱-高分辨质谱联用仪器自带软件对一次分析的全部样本的原始数据同时进行峰对齐和峰匹配，导出化合物列表文件中包含化合物分子量、保留时间、以及在不同样本中的响应面积。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(2)中扣除空白干扰是基于对2个以上提取剂和2个以上复溶剂分别与样本采用相同的操作条件进样分析，将待测样本与空白溶剂一同进行峰匹配，根据导出的化合物列表中化合物在空白溶剂中的响应，即在至少两个相同空白溶剂中响应面积超过2×10⁵的物质被删除。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤(2)中采用食品内源性组分过滤的方法筛选风险化合物，其具体过程为：与步骤(1)相同的方法对尽可能5个地区(县级以上区划)来源以上的80个以上的牛奶样本进行分析，经过峰匹配和扣除空白，根据80％规则，即在80％以上的样本中检测到的化合物，定义为食品内源性组分，以此建立食品内源性组分数据库，包含化合物分子量和保留时间；

食品内源性组分过滤：在待测牛奶样本兽药筛查中，可通过样本中的化合物分子量和保留时间与食品内源性组分数据库中的化合物相比较，分子量偏差在5ppm以内、保留时间偏差在0.2min以内的化合物认为是相同的化合物，以去除与食品内源性组分数据库中相同的化合物。