[发明专利]一种用于诊断乳腺癌的鸡尾酒免疫组化试剂盒

说明书

本发明涉及一种用于诊断乳腺癌的鸡尾酒免疫组化试剂盒，包含过氧化物酶封闭剂、组合一抗、组合二抗、DAB显色底物、DAB显色缓冲液、快红显色剂、快红显色活化剂、快红缓冲液以及苏木素复染液，其中，所述组合一抗包括鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体、鼠抗人P63单克隆抗体和兔抗人MHC单克隆抗体；所述组合二抗包括HRP标记的抗鼠二抗聚合物和AP标记的抗兔二抗聚合物。本发明的试剂盒采用鸡尾酒组合一抗，能够在同一张组织切片上同时检测CK7、P63、MHC三种抗原靶标的表达情况，减少样本使用量，避免不同张切片带来的差异，解决微小组织样本染色重复性差的问题，且能直观鲜明的辨别正常组织和癌组织，为病理医师提供更全面可靠的诊断依据，提高诊断精准度。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种用于诊断乳腺癌的鸡尾酒免疫组化试剂盒。

背景技术

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤，据2018年统计数据显示，全世界女性的乳腺癌发病率和死亡率分别为4.63‰和1.3‰，且呈现逐年上升的趋势。中国由于人口基数的原因，我国女性乳腺癌的发病人数和死亡人数均在世界首位。因此乳腺癌的早诊早治以及预防成为我国癌症控制的重点方向。

很多研究表明，乳腺癌的发生与发展是一个多步骤过程，先由正常的上皮增生到不典型性增生再到原位癌继而发展成浸润性癌最终变成转移癌。浸润性乳腺癌的一个十分明显的特征是肌上皮细胞层的缺失，当肌上皮细胞层这一保护屏障缺失后，癌细胞就很容易侵入间质及转移，因此肌上皮细胞存在与否常常是区别乳腺良恶性病变的重要依据之一。但是在临床上，从形态学上区分乳腺恶性病变中的原位癌与早期浸润癌，尤其是微浸润癌，始终是临床病理诊断的难题，对于乳腺组织较小的穿刺标本更是困难。

目前，对乳腺癌的病理检测主要依赖于免疫组织化学法(immunohistochemistry，IHC)，利用合适的免疫组化抗体来检测抗原靶标，通过不同指标的表达情况来鉴别疾病的分型。该方法的缺点是：①单个样本的染色切片数量多，需要判读多张切片的染色结果，综合分析，得到病理诊断结果；②IHC对取材样本的大小要求高，而随着技术的迭代发展，乳腺癌患者的肿瘤组织样本变成小活检或细针穿刺术，得到的石蜡块只有有限的肿瘤含量。从这些有限的部分中，病理学实验室必须制作对主要亚型进行诊断所必需的HE玻片(通常是两个)以及支持该诊断的其他玻片，所以存在很大的弊端。

针对这种现象，免疫显色试剂(双染)问世，该产品的改进在于：①与抗体结合的酶标二抗聚合物是辣根过氧化物(HRP)标记的抗鼠二抗聚合物和碱性磷酸酶(AP)标记的抗兔二抗聚合物的组合试剂；②显色剂有两种，分别是两种酶的显色底物，呈现不同的颜色，棕色和红色；③在同一张组织切片上可以呈现两种颜色，标记至少2种抗原靶标。但是，该技术仍然存在一些问题，在同一张切片上检测多个抗原靶标时，抗体试剂必须单个顺次孵育，造成免疫组化试验时间过长，技术操作工作量未减少，并且，试剂盒不包含抗体试剂。同时，该试剂仅可用于手工免疫组化试验的操作，没有实现自动化，也不利于日常的工作需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于诊断乳腺癌的鸡尾酒免疫组化试剂盒，该试剂盒采用鸡尾酒组合一抗，能够在同一张组织切片上同时检测CK7、P63、MHC三种抗原靶标的表达情况，为病理医师提供更多诊断信息，提高诊断的精准度，同时解决微小组织样本染色重复性差的问题。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种用于诊断乳腺癌的鸡尾酒免疫组化试剂盒，包括过氧化物酶封闭剂、组合一抗、组合二抗、DAB显色底物、DAB显色缓冲液、快红显色剂、快红显色活化剂、快红缓冲液以及苏木素复染液，其中，所述组合一抗包括鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体、鼠抗人P63单克隆抗体和兔抗人MHC单克隆抗体；所述组合二抗包括HRP标记的抗鼠二抗聚合物和AP标记的抗兔二抗聚合物。

优选的，所述组合一抗中鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体克隆号为EP16,鼠抗人P63单克隆抗体克隆号为MyR1-P63,兔抗人MHC单克隆抗体克隆号为SMMS-1。