[发明专利]一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法在审
申请号: | 202110745326.7 | 申请日: | 2021-07-01 |
公开(公告)号: | CN113311171A | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 韩毓旺;刘启迪 | 申请(专利权)人: | 南京无书化工有限公司;南京工业大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N21/31 |
代理公司: | 深圳市创富知识产权代理有限公司 44367 | 代理人: | 朱易顺 |
地址: | 210000 江苏省南京市江北新区智能制造*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 硼酸 亲和 原理 检测 糖化 血清 白蛋白 方法 | ||
1.一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、取一定体积的溴甲酚紫溶液在比色皿中;
S2、将待测血清样本加入到溴甲酚紫溶液中;
S3、通过测定585nm的吸光度来得到总白蛋白浓度CT;
S4、将苯硼酸吸附剂加入到比色皿中与BCP-GA发生反应;
S5、等待吸附剂完全沉积在比色皿底部;
S6、测定585nm的吸光度来得到非糖化白蛋白的浓度Cng,并通过公式(CT-Cng)/CT*100%计算出糖化血清白蛋白的比例。
2.根据权利要求1所述的一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法,其特征在于,所述步骤S1、S2和S3是在碱性性条件下即pH9的状态下获得溴甲酚紫溶液585nm的吸光度A0,并且加入血清样本后总血清白蛋白与BCP形成复合物,测定吸光度A1,由A0-A1计算得到总血清白蛋白含量CT。
3.根据权利要求2所述的一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法,其特征在于,所述步骤S4、S5和S6中通过可以选择性结合糖化血清白蛋白的苯硼酸试剂将其与非糖化血清白蛋白分离,再次测定585nm吸光度A2,由A2-A1计算得到非糖化血清白蛋白的含量Cng。
4.根据权利要求1所述的一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法,其特征在于,所述测定糖化血清白蛋白方法包括:
(a)将血样加入到溴甲酚紫检测液当中,让总血清白蛋白与溴甲酚紫充分反应形成BCP-HSA;
(b)使用分光光度计在585nm对总血清白蛋白定量;
(c)将偶连苯硼酸基团的微球加入到已和溴甲酚紫反应的溶液中,让苯硼酸微球与BCP-GA特异性结合并充分反应形成微球-GA-BCP;
(d)微球-GA-BCP因为重力会在一分钟后沉降在底部;
(e)使用分光光度计在585nm对非糖化的血清白蛋白进行定量;
(f)通过测定出来的总血清白蛋白和非糖化血清白蛋白来计算糖化血清白蛋白比例。
5.根据权利要求4所述的一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法,其特征在于,所述测定非糖化血清白蛋白比例的方法中,可以将偶连苯硼酸基团的微球直接加入到溶液当中测定。
6.根据权利要求4所述的一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法,其特征在于,所述测定非糖化血清白蛋白比例的方法中,也可以用磁珠偶连苯硼酸基团加入到溶液中与糖化血清白蛋白结合,再用磁力分离测定。
7.根据权利要求4所述的一种利用硼酸亲和原理来检测糖化血清白蛋白的方法,其特征在于,所述测定非糖化血清白蛋白比例的方法中,还可以将微球填充到细管中利用针筒进行测定。
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