[发明专利]一种改造的巨噬细胞及其应用

权利要求书

1.一种巨噬细胞Adar基因敲除小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述方法基于基因敲除技术对C57BL/6N小鼠的Adar基因进行敲除，然后与Lyz2-Cre工具鼠交配，最终构建出两种不同基因型的小鼠模型；所述的小鼠模型包括Flox/Flox,Lyz2-Cre基因敲除型和Flox/Flox基因敲除型；所述方法中敲除基因为Adar基因第4-6外显子作为条件敲除区，其核苷酸序列如SEQ NO ID:1所示；所述方法的具体步骤包括：

步骤1、为了工程化靶向载体，使用BAC克隆RP23-146K23作为模板通过PCR产生同源臂和条件敲除区，采用PCR引物序列为：

F1：5’-TCCTTATATCAGCGAAACAGCCA-3’，R1：5’-AGCAAGCTCTCCCAGACAGTC-3’；

步骤2、在靶向载体中，Neo盒的两侧为自动删除锚定位点，DTA将用于阴性筛选；

步骤3、将靶向载体电转入C57BL/6N小鼠的胚胎干细胞中，与Cre基因重组后获得Adar基因敲除的Flox/Flox小鼠；

步骤4、将Flox/Flox小鼠与Lyz2-Cre工具鼠交配后，获得重组杂合仔鼠；

步骤5、将重组杂合仔鼠与Flox/Flox仔鼠进行回交，获得Adar基因敲除的Flox/Flox,Lyz2-Cre小鼠。

2.一种根据权利要求1所述的巨噬细胞Adar基因敲除小鼠模型的应用，其特征在于，所述应用包括在肝脏疾病发病机制的研究以及肝脏疾病药物筛选方面的应用。

3.一种根据权利要求1所述的巨噬细胞Adar基因敲除小鼠模型的应用，其特征在于，所述应用包括在肿瘤细胞应用化疗药物发生耐药的机制以及缓解化疗药物耐药方面的研究。

4.一种根据权利要求1所述的巨噬细胞Adar基因敲除小鼠模型得到改造的巨噬细胞，其特征在于，所述细胞为Adar基因敲除的巨噬细胞。

5.一种根据权利要求4的巨噬细胞，其特征在于，所述细胞在抑制肿瘤大血管生成和抑制肿瘤生长方面的研究中应用。