[发明专利]基于棘突蛋白基因修饰干细胞的新型冠状病毒疫苗、其制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种基于棘突蛋白基因修饰干细胞的新型冠状病毒疫苗、其制备方法及应用。所述疫苗的活性成分为三聚体形式的棘突蛋白基因修饰的间充质干细胞，用于表达棘突蛋白的核苷酸序列具有SEQ ID NO：2所示序列。所述制备方法包括：构建表达棘突蛋白的腺病毒载体、制备棘突蛋白重组腺病毒颗粒、纯化富集腺病毒颗粒、获取间充质干细胞、获取棘突蛋白编码基因修饰的人脐带间充质干细胞。本发明的疫苗通过棘突蛋白的基因重组型间充质干细胞表达棘突蛋白来启动人体针对新型冠状病毒的免疫反应，产生病毒中和性抗体，从而避免病毒对人体的感染，安全、可靠、有效，具有良好的应用前景，为新型冠状病毒的预防提供了全新的选择。

技术领域

本发明涉及疫苗技术领域，具体涉及一种基于棘突蛋白基因修饰干细胞的新型冠状病毒 疫苗、其制备方法及应用。

背景技术

2019-nCov病毒感染者的症状一般为发热、乏力、干咳、头疼，逐渐出现呼吸困难，严 重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能 障碍，甚至死亡。病毒潜伏期最短有1天发病，最长的潜伏期是14天，潜伏期具有传染性。

然而，目前没有特别有效的治疗手段，对患者主要采用先隔离，然后雾化吸入α-干扰素， 口服洛匹那韦/利托那韦，及短期内使用糖皮质激素。然而这些治疗方法的有效率并不高。病 毒感染造成的肺纤维化(pulmonary fibrosis)也是发病中重要的临床表现，肺纤维化可对肺造 成不可逆的伤害，可导致进行性呼吸困难，肺功能受损，严重者可致死亡。

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是干细胞家族的重要成员，来源于发育 早期的中胚层，属于多能干细胞，MSCs最初在骨髓中发现，随后还发现存在于人体发生、 发育过程的许多种组织中。因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控 和自我复制等特点而日益受到人们的关注。

研究发现，MSCs是一种幼稚的发育早期的具有分化潜能的细胞，它具有以下几种特性： 1)具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下具有分化为肌细胞、肝 细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力；2)具有免疫调节功能， 通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增殖及其免疫反应，从而发挥免疫重建 的功能；3)趋化性：MSCs可以向受损组织、肿瘤部位迁移；4)具有来源方便，易于分离、 培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性；5)由于无主要组织相容性复合体的 表达，几乎无免疫排斥，异体移植免疫排异较轻，配型要求不严格。正是由于间充质干细胞 所具备的这些独特的免疫学特性，使其在临床治疗方面具有广阔的临床应用前景。

鉴于此，业界亟需发展出一种安全性高、可靠有效的新型冠状病毒疫苗。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明要解决的技术问题在于提供了一种基于棘突蛋白基因修 饰干细胞的新型冠状病毒疫苗及其制备方法与应用，该干细胞可在体内长时间滞留，高效分 泌新型冠状病毒棘突蛋白，启动人体针对新型冠状病毒的免疫反应，产生病毒中和性抗体， 避免病毒对人体的感染。

为解决上述技术问题，本发明通过以下方案来实现：

本发明实施例提供了一种棘突蛋白，用于表达棘突蛋白的核苷酸序列具有SEQ IDNO：2 所示序列，或者与SEQ ID NO：2的全长序列95％以上相同的序列。即，本发明实施例提供的 棘突蛋白的核苷酸序列可以是原始序列，增加或截短的序列。

本发明实施例还提供了用于编码所述棘突蛋白的编码基因。

在一些实施方式中，所述的编码基因具有SEQ ID NO：1所示序列或者与SEQ IDNO：1的 全长序列95％以上相同的序列。