[发明专利]腺病毒抗原多肽及其应用

说明书

本发明涉及免疫学领域，具体而言，涉及一种腺病毒抗原多肽及其应用。本发明所提供的抗原多肽制备简单，可以使用最简单的大肠杆菌表达系统进行表达，且表达knob多肽为三聚体结构，表达量高、免疫原性强，生产和纯化方便、成本低；knob多肽免疫原性强，可以诱导高滴度的中和抗体；最重要的是，HAdV‑40L‑Knob或HAdV‑41L‑Knob诱导的中和抗体对HAdV‑40和HAdV‑41有交叉中和作用，中和滴度相似，可以作为广谱人肠道腺病毒疫苗应用。

技术领域

本发明涉及免疫学领域，具体而言，涉及一种腺病毒抗原多肽及其应用。

背景技术

人肠道腺病毒(Human adenovirus，HAdV)于1953年最早从人类的腺样组织分离出来，故名为腺病毒。其对淋巴腺有亲和力，可以在淋巴腺中潜伏很久。它们引起多种疾病，包括上呼吸道感染，结膜炎(眼部感染)，膀胱感染，肺炎，脑炎和肠胃炎。它们也与心脏病和肥胖症有关。

HAdV包括两种型别HAdV-40和HAdV-41，是引起儿童病毒性腹泻的第二重要病原，目前没有特异性药物和疫苗，临床以支持、对症治疗为主。重组蛋白疫苗成本低、制备方便，目前已有多种重组蛋白疫苗在临床使用，但没有针对人肠道腺病毒的疫苗。

腺病毒衣壳主要包括纤毛蛋白、五邻体基座和六邻体，现有技术研究一般认为六邻体是腺病毒的主要中和抗原，而纤毛蛋白是吸附细胞的受体结合蛋白，是次要的中和抗原，其诱导中和抗体的能力较差，与受体结合的主要结构域位于纤毛蛋白头(knob)。腺病毒包括有7组52种血清型，不同血清型间没有交叉中和作用，包括HAdV-40和HAdV-41之间也没有交叉中和作用。本发明申请人之前已经发现并证明大肠杆菌表达系统分别重组表达人3型、7型、11型、55型腺病毒knob多肽，免疫小鼠可以诱导高滴度中和抗体，并发现其中一些型别的knob抗体有一定的交叉中和作用，可以作为多价腺病毒疫苗候选。

完整的HAdV-40和HAdV-41病毒粒子免疫只能诱导型特异性中和抗体，没有型间交叉保护作用；不同型别腺病毒基因组间易发生重组，可能产生毒力更强的新型腺病毒；人肠道腺病毒细胞培养困难，产量低；因此人肠道腺病毒难于研制传统的灭活或减毒活疫苗。因此如何研制一种能够同时预防HAdV-40和HAdV-41的高免疫原性、低成本的疫苗是我们要解决的问题。

发明内容

本发明发明人在研究HAdV-40和HAdV-41两种腺病毒的基因组时，意外地发现HAdV-40和HAdV-41的长纤毛蛋白有非常较高的相似性，而短纤毛蛋白差异较大，推测长纤毛蛋白可能是受体结合蛋白，长纤毛蛋白的纤毛头部分(L-Knob)可能是受体结合结构域，可能作为亚单位疫苗候靶标。经过测试，由此提出本发明。具体的为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明的第一方面涉及抗原多肽，其为SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：2所示的多肽。

本发明的第二方面涉及分离的核酸，其表达权利要求1所述的抗原多肽。

可选的，如上所述的核酸，其为SEQ ID NO：3和/或SEQ ID NO：4所示的核苷酸片段。

本发明的第三方面涉及载体，其含有如上所述的核酸。

本发明的第四方面涉及宿主细胞，其含有如上所述的核酸，或被如上所述的载体所转化。

可选的，如上所述的宿主细胞，其为大肠杆菌。

本发明的第五方面涉及生产如上所述的抗原多肽的方法，包括：

在合适的培养条件下培养如上所述的宿主细胞；以及

从培养基中或从所培养的宿主细胞中回收如此产生的抗原多肽。

本发明的第六方面涉及疫苗，其含有如上所述的抗原多肽，或权利要求2或3所述的核酸，或权利要求4所述的载体。