[发明专利]一种蓝光调节启动子、蓝光调节启动子的融合基因、蓝光介导调节质粒及构建方法和应用有效
| 申请号： | 202110731798.7 | 申请日： | 2021-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN113462688B | 公开（公告）日： | 2022-07-29 |
| 发明（设计）人： | 张后今;闫云君;王志乾;龚梦瑶;韩娟;张婷 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/81;C12N15/62;C07K19/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 薛红凡 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 调节 启动子 融合 基因 蓝光介导 质粒 构建 方法 应用 | ||
1.一种适用于解脂耶氏酵母的蓝光调节启动子PC120-CYC，其特征在于，所述蓝光调节启动子PC120-CYC的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.含权利要求1所述的启动子PC120-CYC的融合基因，其特征在于，所述融合基因包括权利要求1所述的蓝光调节启动子PC120-CYC、待表达基因和终止子；所述待表达基因包括报道基因和/或目的基因。
3.根据权利要求2所述的融合基因，其特征在于，当所述报道基因包括GFP时，所述融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种在解脂耶氏酵母中蓝光诱导表达蛋白的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括能够表达权利要求1所述的蓝光调节启动子PC120-CYC和蓝光蛋白SV40-VP-EL的试剂；
所述蓝光蛋白SV40-VP-EL的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.蓝光介导调节质粒，其特征在于，所述质粒包括权利要求2或3所述的融合基因和编码蓝光蛋白SV40-VP-EL的基因；
所述蓝光蛋白SV40-VP-EL的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
6.权利要求5所述的蓝光介导调节质粒的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：
以pINA1296质粒为骨架载体，将编码蓝光蛋白SV40-VP-EL的基因替换pINA1296质粒hp4d promoter和xpr2 terminator之间的序列，得到质粒phSVEx；
所述蓝光蛋白SV40-VP-EL的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；
得到质粒phSVEx后，将融合基因插入质粒phSVEx的hp4d promoter上游得到蓝光介导调节质粒。
7.权利要求1所述的蓝光调节启动子PC120-CYC或权利要求2或3所述的融合基因或权利要求4所述的试剂盒或权利要求5所述蓝光介导调节质粒或权利要求6所述的构建方法构建得到的蓝光介导调节质粒在解脂耶氏酵母蓝光诱导表达蛋白中的应用。
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