[发明专利]基于外泌体miRNA-432-5p表达水平的胃癌恶液质早期诊断试剂盒

权利要求书

1.一种检测血浆中外泌体miRNA-432-5p含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)提取胃癌患者血浆中的外泌体RNA，将所述外泌体RNA中的miRNA反转录，得到外泌体miRNA的反转录本；

2)以所述外泌体miRNA的反转录本为模板，通过实时定量PCR扩增血浆外泌体中的Hsa-miR-432-5p，并确定血浆外泌体中的Hsa-miR-432-5p的扩增循环阈值；

3)计算所述Hsa-miR-432-5p的扩增循环阈值与内参基因的扩增循环阈值的差值ΔCT。

2.根据权利要求1所述一种检测血浆中外泌体miRNA-432-5p含量的方法，其特征在于：所述步骤2)中，血浆外泌体中的Hsa-miR-432-5p的实时定量PCR扩增引物由上游引物和下游引物组成，其中，下游引物为miRNA通用引物，上游引物的序列为：

5`-TCTTGGAGTAGGTCATTGGGTGG-3`。

3.一种胃癌恶液质早期诊断试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括Hsa-miR-432-5p的实时定量PCR扩增引物。

4.根据权利要求3所述一种胃癌恶液质早期诊断试剂盒，其特征在于：所述Hsa-miR-432-5p提取自胃癌患者外周血。

5.根据权利要求3所述一种胃癌恶液质早期诊断试剂盒，其特征在于：所述Hsa-miR-432-5p提取自胃癌患者的血浆外泌体。

6.根据权利要求5所述一种胃癌恶液质早期诊断试剂盒，其特征在于：所述血浆外泌体中的Hsa-miR-432-5p的实时定量PCR扩增引物由上游引物和下游引物组成，其中，下游引物为miRNA通用引物，上游引物的序列为：

5`-TCTTGGAGTAGGTCATTGGGTGG-3`。

7.根据权利要求5所述一种胃癌恶液质早期诊断试剂盒，其特征在于：当胃癌患者血浆外泌体中的Hsa-miR-432-5p的扩增循环阈值与内参基因的扩增循环阈值的差值ΔCT超出限值时，该差值ΔCT越接近限值则表明该患者患恶液质的风险越高。

8.Hsa-miR-432-5p在制备胃癌恶液质早期诊断试剂盒中的应用。

9.Hsa-miR-432-5p的反转录本在制备胃癌恶液质早期诊断试剂盒中的应用。

10.Hsa-miR-432-5p的扩增引物在制备胃癌恶液质早期诊断试剂盒中的应用。