[发明专利]用于肽生产的融合伴侣在审
| 申请号: | 202110725675.2 | 申请日: | 2015-11-30 |
| 公开(公告)号: | CN113444183A | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
| 发明(设计)人: | D·M·雷塔拉克;A·查普曼;T·R·布鲁克;H·金 | 申请(专利权)人: | 菲尼克斯公司 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/78;C12N15/70 |
| 代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平;黄海波 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 生产 融合 伴侣 | ||
1.一种重组融合蛋白,其包含:N-末端融合伴侣,其中所述N-末端融合伴侣是细菌伴侣蛋白或折叠调节子;目标多肽;以及在所述N-末端融合伴侣和所述目标多肽之间的包含切割位点的接头。
2.权利要求1的重组融合蛋白,其中所述N-末端融合伴侣选自:DnaJ-样蛋白;Fk1B蛋白或其截短体;FrnE蛋白或其截短体;FkpB2蛋白或其截短体;EcpD蛋白或其截短体;或Skp蛋白或其截短体。
3.权利要求1的重组融合蛋白,其中所述N-末端融合伴侣选自:荧光假单胞菌DnaJ-样蛋白;荧光假单胞菌Fk1B蛋白或其C-末端截短体;荧光假单胞菌FrnE蛋白或其截短体;荧光假单胞菌FkpB2蛋白或其C-末端截短体;或者荧光假单胞菌EcpD蛋白或其C-末端截短体。
4.权利要求3的重组融合蛋白,其中所述N-末端融合伴侣是荧光假单胞菌Fk1B蛋白,从C-末端除去1至200个氨基酸的截短体;荧光假单胞菌EcpD蛋白,从C-末端除去1至200个氨基酸的截短体;或荧光假单胞菌FrnE蛋白,从C-末端除去1至180个氨基酸的截短体。
5.权利要求1至4任一项的重组融合蛋白,其中所述目标多肽是难以表达的蛋白质,选自:小的或快速降解的肽;具有易降解N-末端的蛋白质;和通常以不溶形式在细菌表达系统中表达的蛋白质。
6.权利要求1至5任一项的重组融合蛋白,其中所述目标多肽是小的或快速降解的肽,其中所述目标多肽选自:hPTH1-34、Glp1、Glp2、IGF-1艾塞那肽(SEQ ID NO:37)、替度鲁肽(SEQ ID NO:38)、普兰林肽(SEQ ID NO:39)、齐考诺肽(SEQ ID NO:40)、贝卡普勒明(SEQID NO:42)、恩夫韦肽(SEQ ID NO:43)、奈西立肽(SEQ ID NO:44)。
7.权利要求1至5任一项的重组融合蛋白,其中所述目标多肽是具有易降解N-末端的蛋白质,其中所述目标多肽是N-met-GCSF或恶性疟原虫环子孢子蛋白。
8.权利要求1至5任一项的重组融合蛋白,其中所述目标多肽是通常以不溶形式在细菌表达系统中表达的蛋白质,其中所述目标多肽是可加工成胰岛素或胰岛素类似物的前胰岛素、N-met-GCSF、GCSF或IFN-β。
9.权利要求7的重组融合蛋白,其中C-肽具有选自SEQ ID NO:97;SEQ ID NO:98;SEQID NO:99或SEQ ID NO:100的氨基酸序列。
10.权利要求7或7任一项的重组融合蛋白,其中所述胰岛素类似物是甘精胰岛素、门冬胰岛素、赖脯胰岛素、谷赖胰岛素、地特胰岛素或德谷胰岛素。
11.权利要求3的重组融合蛋白,其中所述N-末端融合伴侣是具有SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的荧光假单胞菌DnaJ-样蛋白。
12.权利要求3的重组融合蛋白,其中所述N-末端融合伴侣是具有SEQ ID NO:4、SEQ IDNO:28、SEQ ID NO:61或SEQ ID NO:62中所示氨基酸序列的荧光假单胞菌Fk1B蛋白。
13.权利要求3的重组融合蛋白,其中所述N-末端融合伴侣是具有SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:63或SEQ ID NO:64中所示氨基酸序列的荧光假单胞菌FrnE蛋白。
14.权利要求3的重组融合蛋白,其中所述N-末端融合伴侣是具有SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:65、SEQ ID NO:66或SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列的荧光假单胞菌EcpD蛋白。
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