[发明专利]一种基于成骨龛微环境修饰的PDX模型的构建方法及应用有效
| 申请号: | 202110720889.0 | 申请日: | 2021-06-28 |
| 公开(公告)号: | CN113424799B | 公开(公告)日: | 2022-09-02 |
| 发明(设计)人: | 曾东风;贾乙;付文莹 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军陆军特色医学中心 |
| 主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027;A61K49/00 |
| 代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 赵荣之 |
| 地址: | 400042 重*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 成骨龛微 环境 修饰 pdx 模型 构建 方法 应用 | ||
1.一种基于“成骨龛”微环境修饰的PDX模型的构建方法,其特征在于,所述方法具体为:
A、将人脐带间充质细胞置于生物衍生骨上共培养,加入成骨诱导培养基,使细胞分化为成骨细胞,获得负载成骨细胞的生物衍生骨;
B、将负载成骨细胞的生物衍生骨种植于小鼠皮下,1周后,再将原代肿瘤细胞接种在小鼠皮下生物衍生骨的种植部位;
所述人脐带间充质细胞由体外制备获得;
所述生物衍生骨的生物物种来源为:猪;
所述原代肿瘤细胞为白血病细胞、实体肿瘤细胞;
所述“成骨龛”以所述生物衍生骨为基本结构。
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述生物衍生骨的制备方法为:猪长骨干髓端松质骨加工为骨块,再将骨块放入30%双氧水中,38℃浸泡72h,每24h换一次液,再放入双蒸水中浸泡30min,乙醇浸泡24h,丙酮浸泡24h,双蒸水浸泡30min,最后室温干燥8h,真空冷冻干燥,环氧乙烷灭菌,即可。
3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述原代肿瘤细胞来源于人或动物。
4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述脐带间充质细胞与所述生物衍生骨共培养的方法为,将生物衍生骨置于缓冲液中浸泡2天,无血清培养基中浸泡3天,再用胎牛血清浸润,37℃孵育2h,加入脐带间充质细胞悬液,静置4-6h,再加入完全培养基。
5.权利要求1~4任一项所述构建方法所构建的PDX模型在抗白血病药物或抗肿瘤药物筛选中的应用。
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