[发明专利]一种促修复双网络水凝胶及其制备方法与应用有效

专利信息
申请号: 202110714167.4 申请日: 2021-06-25
公开(公告)号: CN113336973B 公开(公告)日: 2022-11-08
发明(设计)人: 白莹;沈宣任;韩建东 申请(专利权)人: 中山大学
主分类号: C08J3/075 分类号: C08J3/075;C08J3/24;C08J3/28;C08L5/08;C08L89/00;A61L24/00;A61L24/08;A61L24/10;A61L27/20;A61L27/22;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/52;A61L27/54
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 陈旭红;晏静文
地址: 510275 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 修复 网络 凝胶 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种促修复双网络水凝胶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)去细胞角膜基质水凝胶的制备

将冻干处理后的去细胞角膜基质采用胃蛋白酶溶液消化,得到均相消化液,加入磷酸盐缓冲液PBS,得到去细胞角膜基质dCECM水凝胶溶液;

(2)促修复双网络水凝胶的制备

将改性透明质酸与引发剂溶液混合,与步骤(1)中所述去细胞角膜基质水凝胶溶液混合,加入交联剂混匀,紫外照射,得到促修复双网络水凝胶;

步骤(2)中所述交联剂为羧甲基纤维素/N-羟基琥珀酰亚胺CMC/NHS、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺EDC/NHS及京尼平中的一种;

所述CMC/NHS与dCECM按照n(CMC): m(dCECM)=1:5 ~ 1:100配比;

步骤(2)中所述改性透明质酸和去细胞角膜基质水凝胶的质量比为40:1~1:20;

步骤(2)中所述改性透明质酸为甲基丙烯酸酐化透明质酸HA-MA。

2.根据权利要求1所述促修复双网络水凝胶的制备方法,其特征在于,

步骤(1)中所述胃蛋白酶溶液的用量为胃蛋白酶与所述去细胞角膜基质的质量比为1:10;

步骤(1)中所述PBS的用量为其与均相消化液的体积比为1:9;

步骤(1)中所述去细胞角膜基质采用猪角膜破碎得到;

步骤(1)中所述消化为搅拌消化至不存在基质块材料;

步骤(1)中所述消化完毕后,采用NaOH溶液调节pH至中性,以终止消化。

3.根据权利要求1或2所述促修复双网络水凝胶的制备方法,其特征在于,

步骤(1)中所述胃蛋白酶溶液为盐酸溶液溶解胃蛋白酶得到;

所述盐酸溶液的浓度为0.01 mol/L。

4.根据权利要求1所述促修复双网络水凝胶的制备方法,其特征在于,

步骤(2)中所述引发剂为苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐LAP、AIBN中的一种;

步骤(2)中所述引发剂溶液采用的溶剂为PBS。

5.根据权利要求1所述促修复双网络水凝胶的制备方法,其特征在于,

所述CMC/NHS中CMC和NHS的摩尔比为1:10 ~ 10:1;

所述EDC/NHS中EDC和NHS的摩尔比为1:10 ~ 10:1;

所述EDC/NHS与dCECM按照n(EDC): m(dCECM)=1:5 ~ 1:100配比。

6.根据权利要求1所述促修复双网络水凝胶的制备方法,其特征在于,

步骤(2)中所述去细胞角膜基质水凝胶在体系中的浓度为1~ 100 mg/mL;

步骤(2)中所述改性透明质酸在体系中的的浓度为1~ 400 mg/mL;

步骤(2)中所述引发剂溶液在体系中的浓度为0.001~ 30 mg/mL。

7.根据权利要求1所述促修复双网络水凝胶的制备方法,其特征在于,

步骤(2)中所述交联剂或者在步骤(1)中制备去细胞角膜基质水凝胶溶液过程中与PBS一同加入;

步骤(2)中所述与去细胞角膜基质水凝胶溶液混合之后,加入种子细胞或者生长因子、药物,得到的促修复双网络水凝胶能够进一步促进角膜再生;

所述药物为维生素C、胰岛素、转化生长因子β;

步骤(2)中所述紫外照射为采用波长320~500 nm的紫外光照射5 ~ 90 s。

8.一种促修复双网络水凝胶,其特征在于,通过权利要求1-7任一项所述制备方法制备得到。

9.权利要求8所述促修复双网络水凝胶在组织修复和再生中的应用。

10.根据权利要求9所述应用,其特征在于,

所述组织为角膜;

所述应用是将促修复双网络水凝胶作为角膜伤口粘合剂、角膜穿孔封堵剂或无缝合的板层角膜替代物;

所述促修复双网络水凝胶作为细胞或分子载体,负载生长因子、细胞、药物,进一步促进修复;

所述药物为维生素C、胰岛素、转化生长因子β。

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