[发明专利]一种杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体与应用

说明书

本发明涉及食品安全技术领域，尤其涉及一种杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体与应用。本发明所述杂交瘤细胞株为抗猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的杂交瘤细胞株skTnT‑2E8，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2021年3月12日，保藏编号为CCTCCNO:C202158。采用本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体为IgG2a亚型，效价能达到1:4.1×10⁵，亲和力常数Ka＝5.14×10⁶L/mol。为特异性的检测猪骨骼肌肌钙蛋白T提供了依据。

技术领域

本发明涉及食品安全技术领域，尤其涉及一种杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体与应用。

背景技术

目前，国内外许多实验室都使用分子生物学技术手段检测肉制品中的源性成分，DNA检测方法手段多样，主要为核酸探针杂交、DNA指纹分析、PCR特异扩增、PCR-RFLP等。这些方法具有一定的灵敏度，但同时也存在着成本高、对检测对象要求高、工作量大、不能现场检测等缺点，尤其是对于熟肉制品检测有很大不确定性，因为这很大程度上依赖于熟肉制品的处理过程，生产过程的多样性导致了基因物质的不同水平的降解。再者，该方法只能检测动物DNA的可能来源，必须时刻防止交叉污染，乳汁、血液、脂肪都有可能是DNA的来源。因此，需要其他的辅助方法来进行相互印证。免疫学方法具有灵敏度高、特异性好、成本低、操作方便等特点，适于大批量样品筛选。然而在进行免疫学分析时，制备得到一种特异性高，亲和力好的单克隆抗体显得尤为重要。然而现有技术中并未见具有亲和力高、效价好的抗猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体用于对猪骨骼肌肌钙蛋白T的免疫学分析中的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种特异性高，亲和力好的单克隆抗体用于对猪骨骼肌肌钙蛋白T的免疫学分析中。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株为抗猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的杂交瘤细胞株skTnT-2E8，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2021年3月12日，保藏编号为CCTCCNO:C202158。

本发明还提供了所述的杂交瘤细胞株的制备方法，包括如下步骤：取经过免疫抗原免疫的小鼠的脾细胞与SP2/0细胞按细胞个数比为4～6:1的比例进行PEG融合，筛选得到杂交瘤细胞株。

作为优选，所述免疫抗原为猪骨骼肌肌钙蛋白T抗原。

作为优选，所述小鼠为6～8周龄的雌性Balb/c小鼠。

本发明还提供了所述的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。

作为优选，所述抗体的亚型为IgG2a。

本发明还提供了所述的单克隆抗体在制备检测猪骨骼肌肌钙蛋白T产品方面的应用。

作为优选，所述产品为酶联免疫试剂盒或胶体金层析试纸条。

本发明提供了一种杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体与应用。本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体的效价高、亲和力高，特异性好，为特异、灵敏的免疫测定猪骨骼肌肌钙蛋白T提供了实验依据。

附图说明

图1为抗猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体效价检测图。

图2为抗猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体亚型测定图。

图3为抗猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体特异性检测图。

保藏说明

抗猪骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的杂交瘤细胞株skTnT-2E8，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2021年3月12日，保藏编号为CCTCCNO:C202158。

具体实施方式