[发明专利]一种人类骨髓、脐带血干细胞处理试剂盒及干细胞分离方法

权利要求书

1.一种人类骨髓、脐带血干细胞处理试剂盒，所述的干细胞处理试剂盒由1号液、2号液组成，所述百分比(％)均为重量百分比(W/W)，密度单位：g/ml，1号液、2号液的溶剂均为水；

1号液：0.1％-30％羟乙基淀粉或0.1％-30％甲基纤维素；

2号液：由聚蔗糖和泛影葡胺配制成的密度为1.0-1.2g/ml的分层液组成。

2.根据权利要求1所述的干细胞处理试剂盒，其特征在于：

其中，所述的1号液和2号液是经过温度为100℃-130℃，时间为10分钟-50分钟灭菌的液体。

3.根据权利要求2所述的干细胞处理试剂盒，其特征在于：

其中，所述的1号液和2号液是经过温度为105℃-120℃，时间为15分钟-20分钟灭菌的液体。

4.一种人类骨髓、脐带血干细胞处理的方法，所述方法包括：

第一步，将骨髓、脐带血样品中加入抗凝剂与适量的磷酸盐缓冲液，得到混合液一，且抗凝剂为枸橼酸钠，并将其放置保存在0-4摄氏度的环境下，

第二步，取混合液一，将其加入到含有一份1号液的大容量培养液瓶中，得到混合液二

第三步，使用磁力搅拌器对混合液二进行混匀，搅拌转速为300-500r/min，待搅拌均匀后，静置20-30分钟，

第四步，静置后的混合液二出现分层，使用助理移液器对其上层细胞液进行吸取，助理移液器在使用的时候，其枪头应保证在上层液上液面以下0.5厘米，以及上层液下液面以上0.5厘米之间，将吸取的细胞液进行离心处理并稀释得到干细胞液，铺于2号液上方，再次离心处理得到干细胞层。

5.根据权利要求4所述的人类骨髓、脐带血干细胞分离的方法，其特征在于：离心分离的离心机转速为500-4000转/分钟。

6.根据权利要求5所述的人类骨髓、脐带血干细胞分离的方法，其特征在于：离心温度为18-22度，且离心时间为10-20分钟。