[发明专利]一种NT-proBNP蛋白抗原决定簇多肽及其应用

说明书

本发明提供一种NT‑proBNP蛋白抗原决定簇多肽及其应用。其中所述NT‑proBNP蛋白抗原决定簇多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示序列。本发明所述的NT‑proBNP蛋白抗原是通过使用所述的抗原决定簇多肽与载体蛋白偶联制备的，所述的NT‑proBNP蛋白抗体是由所述抗原制备成的单克隆抗体或多克隆抗体，所述的单克隆抗体和多克隆抗体用于制备NT‑proBNP蛋白检测试剂盒。本发明所述的NT‑proBNP蛋白抗原决定簇多肽具有良好的抗原性，用其制备的抗原免疫动物能够产生特异性抗体，制备的NT‑proBNP蛋白抗体可以特异性地结合人血清中的NT‑proBNP，制备的NT‑proBNP检测试剂盒可有效检测人血清中的NT‑proBNP蛋白水平。

技术领域

本发明涉及多肽化学领域，具体为一种NT-proBNP蛋白抗原决定簇多肽及其应用。

背景技术

急性心肌梗死是冠状动脉急性、持续性缺血硬气的心肌坏死，患者多发生在冠状动脉粥样硬化狭窄基础上，由于某些诱因致使冠状动脉粥样斑块破裂，血中的血小板在破裂的斑块表面聚集，形成血块（血栓），突然阻塞冠状动脉管腔，导致心肌缺血坏死。急性心肌梗死常引发心律失常、休克或心力衰竭等严重临床后果。中国的急性心肌梗死的发病率呈明显上升趋势，每年新发至少50万，现存患者超过200万。

急性心肌梗死具有发病急、预后差和死亡率高的特点，其预后更是降低疾病死亡率的重要环节。因此临床上多使用各种方式进行疾病诊断、病情监测和预后评估，氨基末端脑利钠肽前体（N-terminal pro B type natriuretic peptide，NT-proBNP）的水平正是心衰诊断、监测病情、反应预后情况的标志物之一。2018版《中国心力衰竭诊断和治疗指南》中指出，诊断急性心衰时NT-proBNP水平应根据年龄和肾功能进行分层。

BNP是利钠肽家族的成员之一，来源于心脏，是一种心脏激素。BNP于1988首次在猪脑中发现，后来在人的心脏中分离纯化出且发现心脏的分泌量高于脑部。当心肌细胞受到压力或牵拉刺激后，首先形成B型利钠肽原前体（pre-proBNP），pre-proBNP是由134个氨基酸组成的分子，并在心肌细胞内储存，当pre-proBNP在由心肌细胞中向外分泌时或分泌后会被蛋白酶分解为N端的26个氨基酸组成的信号肽和由108个氨基酸组成的B型利钠肽原（proBNP），后者在内切酶的作用下进一步裂解含有32个氨基酸组成的活性B型利钠肽（BNP）和一个由N端76个氨基酸构成的无活性的B型利钠肽前体（NT-proBNP）。二者均由心肌细胞分泌到血液中，可作为心血管疾病的标志物。相较而言，BNP的半衰期仅20分钟，而NT-proBNP虽无生物学活性，但半衰期长达60-120分钟，且血液中NT-proBNP含量约为BNP的16-20倍。同时，NT-proBNP在个体内变异小，几乎无昼夜变化；而且在血清与血浆中稳定性良好，室温下可稳定3天以上，采血体位对样本结果无明显影响，且其检测结果不受重组BNP等药物干扰。因此，NT-proBNP更易于检测、更灵敏，是临床上更为理想的心衰标志物。

因此，NT-proBNP的浓度测定对于心血管疾病患者的临床诊断、危险分层和预后管理有重要的临床意义与价值。常规的NT-proBNP的检测方法通常是免疫检测，即使用NT-proBNP抗体检测其水平，所以，合适的NT-proBNP蛋白抗原决定簇多肽的发现和制备也成为了NT-proBNP检测的重点。

随着医学检验领域的发展，临床上需要一种兼具高度特异性和抗原性的NT-proBNP蛋白抗原决定簇多肽，以适用于高度特异性抗体的制备与生产。因此，提出一种NT-proBNP蛋白抗原决定簇多肽及其应用，具有良好的应用前景和现实意义。

发明内容

针对上述背景技术中的不足，本发明提供一种NT-proBNP蛋白抗原决定簇多肽及其应用，本发明的抗原决定簇多肽抗原性高，特异性强，可用于制备对应的NT-proBNP特异性抗原和抗体，及NT-proBNP检测试剂盒和应用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：