[发明专利]用于高通量纯化的方法和设备在审
申请号: | 202110698666.9 | 申请日: | 2014-03-14 |
公开(公告)号: | CN113512522A | 公开(公告)日: | 2021-10-19 |
发明(设计)人: | 约瑟夫·迪席尔瓦;罗伯特·H·奥斯汀;詹姆斯·C·斯特姆;陈宇;柯特·I·希文 | 申请(专利权)人: | 普林斯顿大学理事会;马里兰大学巴尔的摩校区 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C12N5/078;C12N5/0787;C12N5/0789 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 韦昌金;郑霞 |
地址: | 美国新*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 通量 纯化 方法 设备 | ||
1.一种在包含血小板的样品中纯化具有至少预定大小的第一颗粒的方法,所述方法包括:
(a)将至少100mL的样品施加至设备,所述样品包含具有至少所述预定大小的第一颗粒以及小于所述预定大小的第二颗粒,其中所述第一颗粒是来自所述样品的白细胞或干细胞并且所述第二颗粒包括来自所述样品的血小板,并且其中所述样品还包含:钙螯合剂;
(b)使至少100mL的所述样品以至少1mL/min的速率流过所述设备,其中所述设备包括布置成行的障碍物阵列,每个后续行的障碍物相对于前一行横向偏移,其中所述障碍物区别地使具有至少所述预定大小的所述第一颗粒偏转至第一出口而使第二颗粒偏转至第二出口,从而纯化具有至少所述预定大小的所述第一颗粒;并且
其中相对于来自缺少所述钙螯合剂的样品的、被捕获在所述设备中的颗粒的数目,来自包含所述钙螯合剂的样品的更少的颗粒被捕获在所述设备中。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述样品是血液样品。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述钙螯合剂以至少5mM的浓度存在。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述钙螯合剂以2mM至7mM的浓度存在。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中所述第一颗粒是白细胞。
6.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中所述第一颗粒是干细胞。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其中所述纯化的细胞的至少90%是活的。
8.根据权利要求1所述的方法,其中所述样品包括细胞毒性T细胞、抗原特异性T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞、调节性B细胞或调节性巨噬细胞。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,包括将至少300mL的样品施加至所述设备。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其中所述钙螯合剂包括EDTA或酸式柠檬酸葡萄糖。
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