[发明专利]一种枯草芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，所述的菌剂由枯草芽孢杆菌经种子活化、种子培养、发酵培养后制成的菌剂，所述的枯草芽孢杆菌为JQ-0101D，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏登记号为CGMCC No.22039。

2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，所述的菌剂优选为液体菌剂。

3.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，该菌剂的制备方法包括如下步骤：

a .菌种活化：将低温保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于固体培养基上，于35-38℃培养34-38h，挑取单菌落转接到斜面培养基上，于35-38℃培养16-24h，用无菌水洗下培养基表面菌体作为接种液；

b .一级种子液制备：按照5％-10％的接种量向种子培养基中接入步骤a制备的接种液，转速200-260rpm，温度35-38℃，摇床培养16-24h，作为一级种子液； c.二级种子液制备：按照0.5％-3％的接种量向种子培养基中接入步骤b制备的一级种子液，通气量为0.4-1.5vvm，搅拌速度为180-260rpm，培养时间为18-24h，作为二级种子液；

d .发酵培养：按照5％-10％的接种量向发酵培养基中接入步骤c制备的二级种子液，通气量为0.4-1.5vvm，搅拌速度为180rpm-260rpm，培养时间为24h-30h，得到发酵液；

e .将上述发酵液通过水洗和分子筛浓缩，得到枯草芽孢杆菌液体菌剂。

4.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，所述步骤b和步骤c中的种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1-2％、蛋白胨1-1.5％、酵母粉0.6-1％、牛肉膏0.5-0.7％、氯化钠0.5％，其余为水。

5.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，所述步骤d中的发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖3-5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母粉0.03-0.08％、蛋白胨0.1-0 .3％、豆粕粉0.5-1 .5％、硫酸镁0.01-0.05％、硫酸锰0.01-0 .05％，其余为水。

6.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，将步骤d所述发酵液进行喷雾干燥，进口温度150-200℃，出口温度50-90℃，加入喷雾载体可溶性淀粉，得到枯草芽孢杆菌粉剂。

7.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，该菌剂应用于防治植物真菌病害，所述的真菌病害具体为根腐病，所述的植物具体为五加科人参属植物。

8.根据权利要求7所述的枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于，所述的五加科人参属植物具体为人参、田七和西洋参。