[发明专利]一种古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒薄层鉴别及总黄酮含量测定的方法

说明书

本发明公开了一种古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒薄层鉴别及总黄酮含量测定的方法，该方法采用薄层色谱(TLC)法对蠲痹颗粒中的羌活、独活、秦艽进行鉴别；以芦丁为对照品，以5％亚硝酸钠‑10％硝酸铝‑氢氧化钠试液为显色体系，在510nm波长下以分光光度法测定总黄酮。结果薄层法色谱鉴别专属性强，斑点清晰，阴性无干扰；芦丁浓度在0.01038～0.06228mg/ml范围内与吸光度线性关系良好,回归方程为y＝12.264x‑0.0061(r²＝0.9999；n＝6),平均加样回收率101.24％(RSD＝1.56％)。本方法简便易行，结果准确，重复性好，用于蠲痹颗粒的质量控制，可为全面评价和控制古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒的质量提供理论依据。

技术领域

本发明涉及一种中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒薄层鉴别及总黄酮成分含量测定，具体的说是一种鉴别蠲痹颗粒中的羌活、独活、秦艽，对活性大类成分总黄酮进行含量测定的方法，属于医药技术领域。

背景技术

中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒祛风除湿，蠲痹止痛，主治风寒湿三气合而成痹者。中医痹症，现代中医将其称之为尪痹，指风寒湿邪侵袭关节，气血痹阻所致的骨关节病，以小关节疼痛，肿胀，晨僵，甚至变形为特点，西医病名类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)为其中一种。类风湿性关节炎为自身免疫疾病，治愈难，发病率有逐年上升的趋势。蠲痹颗粒处方出自清代程国彭《医学心悟》。蠲痹汤，因临床用于防治RA，疗效确切，获批为国家古代经典名方类新药，医学前景良好。

目前国内关于中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒制剂质量控制方面少有研究，为使制剂质量得到有效控制，因此选择蠲痹颗粒中的羌活、独活、秦艽TLC鉴别及活性大类成分总黄酮含量测定的质量评价指标，为控制中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒质量提供科学依据。

本发明建立了中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒羌活、独活、秦艽的TLC鉴别及总黄酮含量测定的检测方法，实验结果表明，本法建立薄层法色谱鉴别法专属性强，斑点清晰，阴性无干扰；以芦丁为对照品，以5％亚硝酸钠-10％硝酸铝-氢氧化钠试液为显色体系，在510nm波长下以分光光度法测定总黄酮含量的方法，简单快速、准确可靠，重复性及稳定性均较好，可作为该制剂的质量控制方法。

发明内容

本发明目的在于提供一种中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒薄层鉴别及总黄酮成分含量测定，该方法简单、稳定、重现性好，可用于该药品的质量控制。

本发明的目的是这样实现的：具体步骤如下：

1、薄层鉴别：

A羌活：精密称取羌活对照药材1.0g置具塞锥形瓶中，加入20ml石油醚(60～90℃)，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加入1ml乙酸乙酯溶解，作为羌活对照药材溶液；精密取蠲痹颗粒样品粉末称取2.0g，同对照药材溶液制备方法，制备供试品溶液；取缺羌活的的阴性样品，同对照药材制备的方法，制成羌活阴性对照溶液。精密吸取供试品溶液、阴性样品溶液和羌活对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯(8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，与对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点。

B独活：精密称取独活对照药材1.0g，加入20ml石油醚(60～90℃)，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为独活对照药材溶液；精密称取蠲痹颗粒粉末2.0g，同对照药材溶液制备方法，制备供试品溶液。取缺独活的阴性样品,同对照药材溶液制备方法,制成独活阴性对照溶液。精密吸取供试品溶液、独活对照药材溶液和阴性样品溶液各5μl，分别同一硅胶G板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(7:3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯光(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。