[发明专利]一种利用微反应器连续制备脂肪链-GLP-1受体激动剂类多肽的方法

权利要求书

1.一种利用微反应器连续制备脂肪链-GLP-1受体激动剂类多肽的方法，其特征在于，主要包括如下步骤：

（i）在传统间歇反应器内确定脂肪链修饰剂修饰GLP-1受体激动剂类多肽的工艺参数；所述的脂肪链修饰剂是指羧基、羟基或胺基被活化的中长链脂肪酸、脂肪醇或脂肪胺，所述脂肪酸、脂肪醇或脂肪胺的碳原子数为8~36，活化基包括马来酰亚胺基、琥珀酰亚胺基和醛基；所述的GLP-1受体激动剂类多肽包括天然GLP-1、艾塞那肽、利司那肽、利西拉来、阿必鲁肽和洛塞那肽；

（ii）设计并构建由泵、微混合器以及微通道组成的微反应器系统，在步骤（i）确定的工艺参数下实现微反应器内连续合成脂肪链-GLP-1受体激动剂类多肽，得到粗品溶液；步骤（ii）中合成脂肪链-GLP-1受体激动剂类多肽的具体步骤为：将脂肪链修饰剂溶于反应溶剂中，配制成均相溶液A；将GLP-1受体激动剂类多肽溶于反应溶剂中，配制成均相溶液B，将均相溶液A和均相溶液B分别同时泵入微反应器的微混合器中，混合均匀后通入微通道中；

（iii）利用脂肪链修饰剂与脂肪链-GLP-1受体激动剂类多肽在缓冲液中溶解性的差异，向步骤（ii）制备的粗品溶液中加入缓冲液，使脂肪链修饰剂沉淀，经固液分离后取上清液，经浓缩得到脂肪链-GLP-1受体激动剂类多肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应溶剂为缓冲液和有机溶剂的混合溶液，其中缓冲液包括磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液和甘氨酸-盐酸缓冲液，有机溶剂包括甲醇、乙醇、乙腈以及二甲基亚砜；缓冲液在反应溶剂中的体积百分比为10%~60%。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，均相溶液A中脂肪链修饰剂的浓度为0.1~5mg/mL；均相溶液B中GLP-1受体激动剂类多肽的浓度为0.5~10 mg/mL；脂肪链修饰剂和GLP-1受体激动剂类多肽的反应摩尔比为20:1~1:1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，均相溶液A泵入微反应器的流量为0.05~1.5 mL/h；均相溶液B泵入微反应器的流量为0.05~1.5 mL/h。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述泵包括注射泵、蠕动泵；微混合器为Y型微混合器或T型微混合器，微混合器的内径尺寸范围为0.01~0.2 cm；微通道的内径尺寸范围为0.01~0.2cm。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述连续合成的条件为反应温度0~50℃，反应停留时间2~10h。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，步骤（iii）中加入的缓冲液包括磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液和甘氨酸-盐酸缓冲液，最终缓冲液占总体系的体积百分比为70%~95%；固液分离包括离心、膜过滤、压滤或抽滤；所述的浓缩包括减压蒸馏、透析。