[发明专利]一种利用C-SiO2在审

专利信息
申请号: 202110691502.3 申请日: 2021-06-22
公开(公告)号: CN113447646A 公开(公告)日: 2021-09-28
发明(设计)人: 周骏懿;陈栩诗;王俊森;陈浩;王秉 申请(专利权)人: 浙江理工大学
主分类号: G01N33/535 分类号: G01N33/535;G01N33/539;G01N21/78
代理公司: 浙江永航联科专利代理有限公司 33304 代理人: 蔡鼎
地址: 310018 浙江省杭州市钱塘*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 利用 sio base sub
【权利要求书】:

1.一种利用C-SiO2吸附材料加速ELISA检测过程的方法,其特征在于包括如下步骤:

步骤1:将含碳物质经球磨机粉碎干燥后过筛,放入容器中并加入去离子水超声分散,混合均匀后室温放置过夜,使其充分浸渍;

步骤2:充分浸渍后,向容器中逐滴滴加四氯化硅,同时不断搅拌;将所得混合物继续搅拌并室温放置,使其充分反应;取出后抽滤多次,并用蒸馏水冲洗滤渣至无氯离子残留;

步骤3:将步骤2所得滤渣在马弗炉中保持200-300℃活化0.5-3h,取出后充分干燥,得到C-SiO2吸附材料;

步骤4:称取步骤3制备得到的C-SiO2吸附材料两份,分别放置于两个容器中,分别向容器中加入抗原、抗体对应缓冲液,振荡使其充分溶解,得到含C-SiO2吸附材料的稀释液;

步骤5:在配制好ELISA所需的抗原、抗体溶液中,分别加入对应的、步骤4所得的含C-SiO2吸附材料的稀释液,振荡使其充分溶解;

步骤6:ELISA过程中,向酶标板中加入抗原或抗体与C-SiO2的混合物在1-5℃下包被1-3h;除去孔中液体,并用洗涤液洗涤多次;加入封闭液后放置于35-40℃烘箱中孵育0.5-1.5h;除去孔中液体,并用洗涤液洗涤多次;滴加对应抗体或抗原C-SiO2的混合物后置于35-40℃烘箱中20-40min;再次除去孔中液体,并用洗涤液洗涤多次;每孔加入TMB显色剂遮光反应5-15min后滴加终止液,10-20min内在450nm波长处测定各孔的OD值。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1中:所述含碳物质为木屑和/或花生壳。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1中:所用球磨机的球料比为1:12-16,使用的三种研磨珠型号为2 mm、6 mm、10 mm,数量比为6:2-3:1,球磨机的设置频率为15-20Hz;球磨后粉碎干燥后过十目筛。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1中:所述含碳物质和去离子水的固液比为(1-2g):(10-20mL);超声时间为10-30min。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2中:含碳物质和滴加的四氯化硅的固液比为(4-5g):(3-4mL);控制加料时间在1-2h内。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2中:室温放置时间为2-4h,抽滤次数为3-5次。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4中:每份C-SiO2吸附材料为0.8-1.2g,每个容器中加入抗原或抗体对应缓冲液80-120mL。

8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤5中,抗原、抗体溶液与步骤4所得的含C-SiO2吸附材料的稀释液混合比分别为1:1-2.5。

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