[发明专利]人源抗新型冠状病毒SARS-CoV-2中和性抗体SK1及其应用

说明书

本发明涉及基因工程抗体技术领域，具体涉及人源抗新型冠状病毒SARS‑CoV‑2中和性抗体SK1及其应用。本发明提供的人源抗SARS‑CoV‑2病毒中和性抗体SK1的轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑3所示，重链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.4‑6所示。该抗体可与新型冠状病毒SARS‑CoV‑2表面S蛋白发生显著的酶联免疫反应，且具有新型冠状病毒SARS‑CoV‑2病毒的中和活性，可制成诊断、预防和治疗新冠肺炎的特异性抗体药物，具有在临床中用于诊断、预防和治疗SARS‑CoV‑2引起的新冠肺炎的潜力。

技术领域

本发明涉及基因工程抗体技术领域，具体涉及人源抗新型冠状病毒SARS-CoV-2中和性抗体SK1及其应用。

背景技术

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019，COVID-19)，简称“新冠肺炎”，是指2019新型冠状病毒感染导致的肺炎。

利用含有特异性抗体的人源或动物血清免疫球蛋白来预防和治疗传染病的方法由来已久。单克隆抗体的体外抗病毒中和活性和体内保护机体抵抗病毒攻击的活性已获得许多实验证明，如汉坦病毒、麻疹病毒、RSV病毒、狂犬病毒等中和性单克隆抗体可以在体内100％保护动物免受病毒攻击。

免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)作为抗体成分主要来自捐献者(恢复期病人)的免疫血清，从获得阳性血清到通过安全性检测耗时较长，且需投入大量的人力和财力，这就使其大量制备受到限制，同时由于抗体主要来源于血清，因此容易发生血源性传播疾病的感染。而使用人源基因工程产品替代血制品则可克服这些缺陷。人源基因工程抗体研究的不断深入为该领域生物制品发展带来了新希望和广阔前景。

90年代初兴起的噬菌体展示技术(Phage Display Techniques)和整个基因工程抗体技术研究领域的发展，极大促进了人源或基因工程抗体的开发研究，并已由基础研究阶段步入实质性应用研究和开发阶段。人源抗病毒基因工程抗体，尤其是人源全抗体的研究成功，给各种病毒性传染病的特异性预防和治疗开辟了新思路，并在抗病毒感染生物医药领域中逐渐开发出一类新的抗病毒药。

鉴于SARS-CoV-2病毒的传染性和致病性，开发针对SARS-CoV-2刺突蛋白的特异性抗体对于疾病的临床治疗和诊断试剂的研发和应用均具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种人源抗新型冠状病毒SARS-CoV-2中和性抗体SK1及其应用。

本发明利用噬菌体展示技术，通过采集多个SARS-CoV-2病人恢复期外周血淋巴细胞，利用基因工程方法构建了人源抗SARS-CoV-2病毒基因工程抗体文库，并筛选获得特异性抗SARS-CoV-2病毒的基因工程抗体Fab片段。该抗体是由存在于抗体轻链和重链可变区中的高变区(CDRs)的特异性序列决定的，并能够在原核细胞中获得有效表达的特异性结合SARS-CoV-2病毒的功能性抗体。该抗体能够特异性识别SARS-CoV-2病毒颗粒抗原，与SARS-CoV-2具有明显的酶联免疫(ELISA)反应和抗SARS-CoV-2病毒感染的中和活性功能。

具体地，本发明提供以下技术方案：

本发明提供人源抗SARS-CoV-2病毒中和性抗体SK1，所述抗体SK1的轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.1-3所示，重链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.4-6所示。

抗体SK1的轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列和重链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列具体如表1所示。

表1 抗体CDR的氨基酸序列