[发明专利]一种治疗脂溢性脱发的干细胞制剂

权利要求书

1.一种治疗脂溢性脱发的干细胞制剂，其特征在于：其由如下重量份的原料混合而成：

干细胞培养浓缩液 8.5-9.5

甘油 0.3-0.7

丙二醇 0.1-0.3

乙醇 0.2-0.4。

2.根据权利要求1所述的一种治疗脂溢性脱发的干细胞制剂，其特征在于，各原料的重量份为：

干细胞培养浓缩液 8.7-9.2。

3.根据权利要求2所述的一种治疗脂溢性脱发的干细胞制剂，其特征在于，各原料的重量份为：

干细胞培养浓缩液 9

甘油 0.5

丙二醇 0.2

乙醇 0.3。

4.根据权利要求1任一项所述的一种治疗脂溢性脱发的干细胞制剂，其特征在于，所述原料中还包括含量为1.5×10^-5-5.0×10^-5mol/L的壳聚糖。

5.根据权利要求4所述的一种治疗脂溢性脱发的干细胞制剂，其特征在于，所述原料中还包括含量为3×10^-5-3.5×10^-5mol/L的壳聚糖。

6.根据权利要求1或5中任一项所述的一种治疗脂溢性脱发的干细胞制剂，其特征在于，所述的干细胞培养浓缩液采用如下的方法制备而成：

S1 取脐带，洗涤至无血迹；两头各剪掉1cm后，把脐带剪成2-3cm的小段，再次洗涤至无血迹；

S2 取出脐带中的华通胶，剪至1±0.1mm³大小；移至培养瓶中放入37℃、5%CO₂的培养箱内培养过夜；

S3 吸取15ml原代细胞培养基于培养瓶中；于37℃、5%CO₂的培养箱内培养，每7天换一次液，并在倒置显微镜下观察细胞的形态和生长情况，至细胞融合度达70-80%止，此为P0代脐带间充质干细胞；

S4 继续培养P0代脐带间充质干细胞的融合度达到80-90%时，进行细胞传代培养：将培养瓶的旧培养基吸弃，加入10ml生理盐水洗涤两遍；弃掉生理盐水，加入2ml细胞消化液，放入培养箱消化1min；加入10ml细胞传代培养基终止消化，将细胞收集到离心管；

S5 1200rpm/min离心8min；

S6 吸弃培养基，重新加入10ml细胞传代培养基重悬，按8×10⁴个细胞/ml进行传代培养；

S7 培养至P3代，添加含有5ng/ml重组灵芝免疫调节蛋白的无血清培养基继续培养72h，收集培养诱导后的细胞培养原液；

S8 采用低温超速离心的方式对细胞培养原液进行浓缩，超速离心时选用截留30 KD分子量蛋白的滤网进行浓缩，得到浓缩液即为干细胞培养浓缩液。