[发明专利]一种基于UPLC-MS/MS检测色氨酸及其代谢物的试剂盒和方法

权利要求书

1.一种基于超高效液相色谱串联质谱法同时检测生物样本中色氨酸及其代谢物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括色氨酸及其代谢物的标准品，其中，所述色氨酸及其代谢物包括：3-羟基犬尿氨酸、5-羟色胺、犬尿氨酸、黄尿酸、色氨酸、犬尿喹啉酸、3-羟基邻氨基苯甲酸、5-羟基吲哚乙酸、3-吲哚乙酸和3-吲哚丙酸。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述标准品为所述色氨酸及其代谢物的标准品的混合标准品。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括内标准品。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述内标准品包括色氨酸-d5和卡马西平。

5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述试剂盒还包括洗脱液A和洗脱液B，其中，洗脱液A为0.1％甲酸水溶液(v/v)；洗脱液B为100％乙腈。

6.一种基于超高效液相色谱串联质谱法同时检测生物样本中色氨酸及其代谢物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用超高效液相色谱仪的流动相及色谱柱对生物样本进行洗脱分离，利用质谱仪对色氨酸及其代谢物的母离子—子离子对进行扫描，获得分析物的峰面积，以各分析物浓度为X轴，以分析物响应峰面积与内标响应峰面积比值为Y轴，建立标准曲线，计算所述色氨酸及其代谢物的含量，其中，所述色氨酸及其代谢物包括3-羟基犬尿氨酸、5-羟色胺、犬尿氨酸、黄尿酸、色氨酸、犬尿喹啉酸、3-羟基邻氨基苯甲酸、5-羟基吲哚乙酸、3-吲哚乙酸和3-吲哚丙酸。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤包括：

S1，获得待测生物样本；

S2，色谱分离：将步骤S2获得的生物样本利用色谱柱进行梯度洗脱，洗脱液A为0.1％甲酸水溶液(v/v)，洗脱液B为100％乙腈；

S3，质谱检测：选择正离子电喷雾电离模式，离子源参数分别为：毛细管电压为2.24kV；溶剂气体温度为450℃；锥/去溶剂化气体流速为150/900L/h进行检测。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤S1中，进一步包括对样本进行预处理的步骤：将生物样本使用乙腈除去蛋白，取上清液进行下一步。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体程序如下表所示：

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述色氨酸及其代谢物的质谱参数如下表所示：