[发明专利]用于促进血运长效开放的多功能水凝胶及其制备方法

权利要求书

1.一种用于促进血运长效开放的多功能水凝胶的制备方法，其步骤如下：

(1)儿茶酚修饰的壳聚糖的制备：取2～4g壳聚糖溶于200～300mL、0.5mol/L的HCl中，充分溶解后用0.1g/mL的NaOH溶液将得到的壳聚糖酸性溶液的pH值调节为4～4.5，得到溶液A；取1～2g儿茶酚溶于8～15mL水中，在搅拌下将其倒入溶液A中，得到溶液B；取1～2g的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶于25～50mL、体积比为1：1的水和乙醇的混合溶液中，然后将其缓慢滴入溶液B中，用1mol/L的NaOH溶液调节溶液的pH为4.5～5，反应4～6h后将反应溶液倒入渗析袋，先在pH＝3～4的盐酸溶液中渗析3～5天，然后在去离子水中渗析6～8h，将渗析液完全冻干后得到儿茶酚修饰的壳聚糖，-90℃～-70℃条件下保存；

(2)醛基化修饰的葡聚糖的制备：取2～4g葡聚糖溶于200～300mL去离子水中，得到溶液C；取3～5g高碘酸钠溶于60～100mL去离子水中，得到溶液D；在避光条件下将溶液D注入到溶液C中反应24～48h，将反应后的液体倒入渗析袋，在去离子水中渗析2～4天，将渗析液完全冻干后得到醛基化修饰的葡聚糖，-90℃～-70℃条件下保存；

(3)纳米明胶微球的制备：取1～2g明胶溶于20～50mL去离子水中，完全溶解后向其中加入20～40mL丙酮，静止片刻后将上层液体弃除，再次用20～50mL去离子水溶解，得到溶液E；然后用1mol/L的盐酸将溶液E的pH值调为1～3，再向其中缓慢滴加60～80mL丙酮，滴加完后向其中加入500～1000μL、质量分数20～50％的戊二醛水溶液，得到溶液F，反应12～24h后将溶液F离心，离心产物用水清洗3～5次后充分冻干得到纳米明胶微球，-90℃～-70℃条件下保存；

(4)将步骤(1)得到的儿茶酚修饰的壳聚糖与步骤(2)得到的醛基化修饰的葡聚糖分别溶于磷酸盐缓冲液中，质量分数分别为3～5％与2～5％，得到儿茶酚修饰的壳聚糖溶液和醛基化修饰的葡聚糖溶液；再将药物分子CORM加入到儿茶酚修饰的壳聚糖溶液中，得到载有药物分子CORM的儿茶酚修饰的壳聚糖溶液，其中药物分子CORM的浓度为100～200μM；CORM：三羰基氯(甘氨酸基)钌，Cas号475473-26-8，CO气体分子药物；

(5)将步骤(3)得到的纳米明胶微球溶于磷酸盐缓冲液中，质量分数为1～10％，得到纳米明胶微球溶液；将药物分子GSNO加入到纳米明胶微球溶液中，药物分子GSNO的浓度为200～500μM，然后将其快速置于液氮中冷冻，充分冻干后得到载有GSNO的纳米明胶微球；取载有GSNO的纳米明胶微球加入到步骤(4)获得的醛基化修饰的葡聚糖溶液中，载有GSNO的纳米明胶微球的质量分数为1～10％，然后将其与步骤(4)获得的载有药物分子CORM的儿茶酚修饰的壳聚糖溶液按体积比1：1充分共混后凝胶5～10s，得到具有黏附止血、抗菌抗感染、可局部梯度缓释两种气体药物分子进而促进血运长效开放的凝胶；GSNO：S-亚硝基谷胱甘肽，Cas号57564-91-7，NO气体分子药物。

2.如权利要求1所述的一种用于促进血运长效开放的多功能水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(1)所使用的壳聚糖黏度值为100～300mpa.s，脱乙酰度为90～95％；所使用的渗析袋截留分子量为10000～15000Da。

3.如权利要求1所述的一种用于促进血运长效开放的多功能水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(2)所使用的葡聚糖分子量为70000～90000Da；所使用的渗析袋截留分子量为3000～3500Da。

4.如权利要求1所述的一种用于促进血运长效开放的多功能水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所使用的明胶为猪皮明胶。

5.如权利要求1所述的一种用于促进血运长效开放的多功能水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(4)和步骤(5)中所使用的磷酸盐缓冲液的pH＝7.2～7.4。

6.如权利要求1所述的一种用于促进血运长效开放的多功能水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所合成的纳米明胶微球粒径为100～300nm。