[发明专利]一种提纯低载量病原体中核酸的方法

权利要求书

1.一种提纯低载量病原体中核酸的方法，其特征在于，包括：

步骤1，将病原体溶液进行裂解，之后导入微流控芯片(1)中；

步骤2，将特异性磁珠颗粒导入微流控芯片(1)中，形成芯片内磁珠塞；

步骤3，裂解的病原体溶液与特异性磁珠颗粒结合；

步骤4，采用洗涤液对结合后的磁珠-核酸进行多次洗涤，去除磁珠周围的样本杂质；

步骤5，对结合后的磁珠-核酸进行洗脱工作，收集洗脱液，在所述洗脱液中进行磁珠-核酸解吸附过程，去除磁珠并纯化核酸样本液，收集洗脱液，得到纯化后的核酸样本；

将病原体溶液置于液体存储器(22)的复合样本存储器(225)中，进行裂解，之后导入微流控芯片(1)中；

采用间断抽取模式将存储在液体存储器(22)中相应的反应液抽入到所述微流控芯片(1)的溶液输入腔(11)中，所述间断抽取模式为在两类反应液之间抽取一段气体，形成“液体A-气体-液体B”的气液供给模式。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将参与病原体裂解所需的裂解混合液与样本原液按照一定比例依次通入复合样本储存器(225)中，关闭第二开关部件(102)防止未经充分反应的复合样本进入微流控芯片(1)。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述裂解混合液与样本原液按照3:1-5:1的体积比混合。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述病原体样本裂解过程中通过外接振荡器、施加热源辅助加热复合样本储存器(225)的方式促进病原体样本裂解。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2包括：

步骤2-1，液体分配器(31)通过机械选通磁性粒子储存器(222)对应通道，打开试剂给液支通道上第一开关部件(101)，在给液驱动器(21)作用下，将充分混匀的磁珠液经第一开关部件(101)输入微流控芯片溶液输入腔(11)；

步骤2-2，关闭第二开关部件(102)，防止磁珠液回流至与第二开关部件(102)相连接的复合样本储存器(225)中，所述磁珠液在给液驱动器(21)的控制下，给富集纯化腔(13)供给磁珠颗粒；

步骤2-3，在富集纯化腔(13)外围的第一磁铁(42)、第二磁铁(43)控制下，磁珠颗粒停留于富集纯化腔(13)中形成磁珠塞；

步骤2-4，在采集控制器(53)的控制下，微流控芯片(1)的出口选通废液收集支通道，经过外围磁场富集后，剩余磁珠废液经废液收集支通道进入废液采集器(52)。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述磁珠液在给液驱动器(21)的控制下，以低于300μL/min流速给富集纯化腔(13)供给磁珠颗粒。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3包括：

步骤3-1，打开试剂给液支通道的第二开关部件(102)，在给液驱动器(21)作用下，将充分裂解的复合样本经第二开关部件(102)输入微流控芯片(1)的溶液输入腔(11)；

步骤3-2，关闭第一开关部件(101)，防止复合样本液回流至与第一开关部件(101)相连接的液体分配器(31)中，复合样本液经给液驱动器(21)驱动流经气泡捕获机构(12)后进入富集纯化腔(13)；

步骤3-3，所述富集纯化腔(13)外围的第一磁铁(42)、第二磁铁(43)在磁铁驱动器(41)控制下发生匀速转动，在外围不断变化的磁场作用下，静态磁珠塞开始在所述富集纯化腔(13)中产生规律运动，形成动态磁珠塞；

步骤3-4，所述微流控芯片出口选通废液收集支通道，使经过核酸-磁珠结合后的剩余废液，经废液收集支通道进入废液采集器(52)。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述步骤3-3中复合样本液的流速控制在150μL/min以内。