[发明专利]一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1及其应用

说明书

本发明公开了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1及其应用。属于基因工程技术领域。本发明筛选克隆到了参与花青素合成的MYB转录抑制因子：LrETC1，其基因cDNA共240bp，编码79个氨基酸；通过蛋白序列数据库分析显示属于R3类MYB转录因子。多重序列比对和进化树分析表明其属于AtCPC‑like类转录抑制因子。是定位于细胞核中的没有激活功能的转录因子。通过农杆菌介导的遗传转化获得LrETC1转基因拟南芥株系，与野生型相比，种子的种皮呈现出浅棕色，在高蔗糖浓度胁迫条件下的拟南芥幼苗无色素积累且相关结构基因的表达水平显著下调。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，更具体的说是涉及一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1及其应用。

背景技术

黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murry.)属茄科(Solanaceae)枸杞属落叶多棘刺灌木，其营养丰富，药食兼得，因其富含大量的花青素受到人们广泛关注。花青素具有较强的抗氧化活性，不仅可以帮助植物抵御胁迫环境，而且对促进人类健康也大有脾益。

转录因子，也称为反式作用因子，通常指由基因编码的一类蛋白质，能够与基因启动子区域的相关顺式作用元件特异性结合来激活或抑制基因的表达，从而提高植物对环境的适应性。在花青素的代谢调控中MYB转录因子起着重要的作用，虽然已有研究结果报道了黑果枸杞中几个正调控花青素合成的MYB转录因子，但是关于抑制其花青素合成的MYB转录因子还未见报道。

因此，如何提供一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1及其应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1，其氨基酸序列如SEQID No.2所示。

本发明还提供了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1的基因，基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本发明还提供了包含上述转录抑制因子LrETC1基因的重组载体。

本发明还提供了包含上述转录抑制因子LrETC1基因或上述重组载体的重组菌株。

本发明还提供了上述转录抑制因子LrETC1或上述的基因在枸杞育种中的应用。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种黑果枸杞花青素合成相关的MYB转录抑制因子LrETC1及其应用，相较于现有技术通过黑果枸杞的转录组数据，根据注释结果和MYB转录因子的表达量差异，筛选克隆到了参与花青素合成的MYB转录抑制因子：LrETC1，其基因cDNA共240bp，编码79个氨基酸；通过蛋白序列数据库分析显示含有1个保守的MYB-DNA-binding结构域，属于R3类MYB转录因子。多重序列比对和进化树分析表明其与其他物种中与花青素合成相关的MYB转录抑制因子聚在一类，属于AtCPC-like类转录抑制因子。

qRT-PCR分析显示LrETC1在黑果枸杞的各个组织中均有表达，并随着果实的成熟而表达水平逐渐升高。亚细胞定位和转录活性检测实验表明，LrETC1是定位于细胞核中的没有激活功能的转录因子。

构建植物过表达载体，通过农杆菌介导的遗传转化获得LrETC1转基因拟南芥株系，与野生型相比，种子的种皮呈现出浅棕色，在高蔗糖浓度胁迫条件下的拟南芥幼苗无色素积累且相关结构基因的表达水平显著下调。

附图说明