[发明专利]一种几丁质酶Chi3002及其应用

说明书

本发明提供一种新型几丁质酶，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明所提供的几丁质酶用于制备。本发明所提供的新型弧菌几丁质酶的热稳定性好，在80℃下残余酶活力保持在80％以上。其pH耐受范围较广，在pH 4‑12条件下，残余酶活力保持在80％以上，有较高的应用价值。而且，其在降解几丁质时，降解产物主要为几丁二糖。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种几丁质酶Chi3002及其应用。

背景技术

在海洋环境中，几丁质是最丰富的可再生碳水化合物聚合物，由β-N-乙酰-D-葡糖胺通过β-1,4糖苷键连接而成的链状化合物，并在软体动物、腔肠动物、原生动物、真菌、甲壳类等多种海洋生物中产生，是海洋生物碳和氮的主要来源。如今，大多数海产品加工后产生的海洋废弃物中都含有丰富的几丁质。据估计每年从海洋废弃物中产生约10¹¹吨的几丁质。由于几丁质不易降解，可能对环境造成危害，因此快速降解几丁质对海洋碳和氮的循环至关重要。

生物技术处理海洋废弃物因具有绿色、高效和环保等优点而被广泛应用。在1938年美国科学家Zobell和Rittenberg提出，许多海洋细菌可以利用几丁质作为碳和氮的能量来源。微生物通过向外分泌几丁质酶降解几丁质，并利用降解的产物满足自身生长代谢所需。另外细菌来源的几丁质酶在大范围的盐度、pH值和温度下表现出较强的活力，对于应用于大多数严酷的物理化学的工业进程有重大意义。此外，在医学、生物技术、农业、工业应用和废物管理等领域，几丁质酶具有杀虫、抗真菌、抗疟、降胆固醇、降压和提高食品质量等功效/*-345质酶产生菌在海洋生态系统中对几丁质废弃物的降解、产生的几丁质酶及其降解产物等方面的应用价值吸引了科研人员的极大关注。

发明内容

本发明的目的在于提供一种几丁质酶Chi3002及其应用，即一种热稳定性较高的几丁质酶Chi3002，

本发明所提供的几丁质酶，包含有：

1)氨基酸序列为SEQ ID NO:1的蛋白酶；

MKQKAIYLAVALGLGGLTNVASANEMVNPDGGVVVGYWHNWCDGAGYKGGNAPCVTLEDVDPMYNVVNVSFMKVFDTSEGRIPTFKLDSNIGLSEQQLIDQIEALNKQGRAVLIALGGADAHVELKTGDEQAFADEIIRLTDKFGFDGLDIDLEQSAVTAENNQTVIPAALRLVKEHYQQQGKNFLITMAPEFPYLTEGGKYVPYITGLEGYYDWINPQFYNQGGDGIWVDGVGWIAQNNDALKQEFIYYISDSLSNGTRGFHKIPHDKLVFGIPSNIDAAATGFVQDPQDLYDAFEQLKAQGQALRGVMTWSVNWDMGTNKDGQAYGEKFVKDYGPFVHGQTPPPSSEGEPVFNGINDVRVQHGSSFDPHAGVTASDKEDGDLTNSINVEGSVDVNTVGTYVLVYSVKDSDNNETKQTRTVVVYSLVPEFEGVANTTIQLGEAFDPMAGVKAIDAEDGDLTGQVKVEGSVDVNTLGVYNLVYRVTDSANQTATAQRAVTVSDGSGYPAYEAGKAYEAGEIVTGSDGNLYQCKPWPYTGWCANPSYAPGETVYWSDAWDKL

2)在1)的蛋白上取代、缺失、添加一个或几个氨基酸，具有1)中蛋白酶功效的蛋白酶；

本发明还保护编码上述几丁质酶的基因，其一种具体的核苷酸序列如下：