[发明专利]一种从细胞层中提取细胞外基质层的方法有效
| 申请号: | 202110665664.X | 申请日: | 2021-06-16 |
| 公开(公告)号: | CN113456891B | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
| 发明(设计)人: | 魏强;董翔宇;李洁;张曼 | 申请(专利权)人: | 成都微沃科技有限公司 |
| 主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36;A61L27/50 |
| 代理公司: | 成都佳划信知识产权代理有限公司 51266 | 代理人: | 史姣姣 |
| 地址: | 610000 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 细胞 提取 基质 方法 | ||
1.一种从细胞层中提取细胞外基质层的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将纤维连接蛋白或明胶加入缓冲液中,在不低于37℃下搅拌均匀,得到混合液体;所述纤维连接蛋白或明胶在混合液体中的浓度为50-200mg/mL;
采用膜式过滤器过滤所述混合液体,并将过滤后的混合液体置于模具内;
在低于25℃冷冻,直至溶液凝胶化,得到溶液凝固形成凝胶;
将凝胶从模具内取出,并盖在培养有细胞的盖玻片上方,并按压凝胶使凝胶与细胞充分接触;
撕下凝胶,并采用37℃的缓冲液冲洗盖玻片,得到基底的细胞外基质。
2.根据权利要求1所述的一种从细胞层中提取细胞外基质层的方法,其特征在于,所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。
3.根据权利要求1或2所述的一种从细胞层中提取细胞外基质层的方法,其特征在于,所述缓冲液的浓度为50-250mM。
4.根据权利要求1或2所述的一种从细胞层中提取细胞外基质层的方法,其特征在于,所述缓冲液的pH值为6-8。
5.根据权利要求1所述的一种从细胞层中提取细胞外基质层的方法,其特征在于,所述膜式过滤器的过滤孔径为0.22μm或0.45μm。
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