[发明专利]一种封片新方法

说明书

一种封片新方法。本发明属于生物技术领域，公开了一种水性UV固化树脂在封片中的应用，本发明水性UV固化树脂经紫外光照射10秒‑1分钟内即可完成固化，固化后的样本，背景明亮清澈，细胞核结构清晰，细胞膜边界对比度高，色彩无失真现象，染色液无被溶解晕染情况；与中性树胶的封片效果相同，但背景明显更加明亮，透光度方面优于中性树胶；由于不需要使用乙醇、二甲苯等溶剂，整个流程高效快捷，绿色环保，质量提升。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种载玻片表面封固新方法。

背景技术

在医学检测领域，将细胞成分或组织切片转移至载玻片上，经染色等处理后，进行显微镜观察，是重要的检测手段之一，应用十分广泛。为防止样本暴露在空气中氧化变色，或防止外来污染，使样本片子能够长久保存，需要将载玻片有样本的区域，用合适的方法封固起来，此过程称为封片。

目前常用的封片方法，是使用有机溶剂如乙醇、二甲苯等对载玻片的样本区域进行脱水、脱乙醇等步骤，然后滴加中性树胶或封片胶，再贴附盖玻片来进行封片。待胶固化后，即形成了两面为玻璃中间为透明封固层的三明治结构，最终将样本封固在了固化的胶内。上述传统方法虽然应用广泛，但不足之处十分明显。首先，操作步骤繁琐，需消耗大量时间；“脱水”需要至少2次或更多次才能完成，将片子浸泡在二甲苯中进行脱醇，时间很长。其次，在封片过程中需要使用乙醇、二甲苯等有机溶剂进行脱水、脱醇处理，污染环境；最后，固化时间较长，至少几个小时甚至几天。中性树胶自然干透固化，至少36小时，即使用烤箱烘干，也至少2小时。

而使用乙醇、二甲苯这样的危险品和高度类似试剂，完全是为了迎合中性树胶的使用，而不是为了染色本身。由于细胞内部75％都是水，因此，染色液必然是水溶性的，才能够进入细胞进行染色。这就决定了染色液的基质必然是水或可与水互溶的溶剂，通常使用甲醇或乙醇等。中性树胶是由加拿大树胶用二甲苯稀释而配制成的，与水不互溶。因此，要想使用中性树胶进行最后的封固，必须要将染色后的细胞内部液体，全部置换成二甲苯，或者可与二甲苯互溶的溶剂，否则，会因为不互溶而出现雾状甚至牛奶状的后果，导致无法看清细胞。只要找到合适的中性树胶替代品，即可省略乙醇及二甲苯等有机溶剂的使用。

因此，如何提供一种绿色环保、高效快捷的封片新方法是研究人员迫切需要解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种封片新方法，以解决现有封片方法步骤繁琐、耗时长及污染环境等问题。

为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种水性UV固化树脂在封片中的应用。

其中，本发明所述水性UV固化树脂为在UV固化树脂的基础上引入了水性基团或链段，使树脂具有一定的亲水性和吸水性。

优选的，所述水性UV固化树脂为不饱和聚酯类树脂、聚氨酯丙烯酸酯或环氧丙烯酸酯。

本发明还提供了一种封片方法，样本用水性UV固化树脂封片，紫外光照射固化。

优选的，所述样本为细胞成分或组织切片。

优选的，所述样本为染色样本或非染色样本。

优选的，所述样本染色后用清水冲洗。

优选的，所述紫外光的波长为315-400nm。

优选的，所述紫外光照射时间为10秒-1分钟。

优选的，所述紫外光源与玻片的距离小于10cm。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明利用水性UV固化树脂来替代中性树胶进行封片。水性UV固化树脂是成熟的工业产品，生产企业众多，原料易得，无需使用者自己费时配制，有利于大规模采购和推广。