[发明专利]一种GnRH多肽修饰的探针、包含它的制剂、药物组合物及其制备方法与应用

说明书

本发明属于生物医药成像领域，公开了一种GnRHa‑PEG‑Rh760探针、制剂、药物组合物及其制备方法和应用，所述探针具体为GnRH多肽修饰的聚乙二醇化Rh760成像探针，所述探针由GnRH多肽、FMOC‑PEG2000‑COOH、近红外荧光染料Rh760偶联而成。本发明利用聚乙二醇的修饰，制备得到具有优良化学特性与组织生物学分布的成像探针，并在GnRH受配体介导的组织特异性结合，以及Rh760近红外荧光特性的基础上，通过静脉给药，实现表达GnRH受体的肿瘤病灶和转移灶的特异性显像，进一步提高了探针在荧光成像和荧光指导手术中的应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药成像领域，涉及一种一种GnRH多肽修饰的探针、包含它的制剂、药物组合物及其制备方法与应用，具体涉及GnRH多肽修饰的聚乙二醇化Rh760成像探针、包含它的制剂、药物组合物及其制备方法与应用。

背景技术

手术切除是实体瘤的主要治疗手段，术中对肿瘤病灶的准确识别是提高手术疗效的关键。现有的影像学检查均为肿瘤非特异性成像，且难以便捷地在术中实时显示肿瘤病灶，进而无法为术者提供指导。

肿瘤靶向的荧光成像探针，可相对特异地识别肿瘤细胞，通过术中荧光成像的方式实时显示肿瘤病灶。促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)受体在激素相关性肿瘤(卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、前列腺癌)、以及其他肿瘤(胰腺癌、肺癌、黑色素瘤、脑胶质瘤)中呈现出较高的表达率；而其在正常生理条件下的表达相对局限于垂体和生殖系统。因此，GnRH受体有望作为肿瘤特异性成像的靶位点。而能够与其特异性结合的GnRH类似物，即GnRH受体激动剂或拮抗剂，则可用作成像探针的靶向定位基团。

本课题组在前期利用临床药物GnRH受体拮抗剂西曲瑞克Cetrorelix的氨基酸序列，修饰近红外荧光染料吲哚菁绿(Indocyanine green,ICG)，开发了GnRHa-ICG靶向探针。该探针可在腹腔给药的条件下，特异性显像卵巢癌腹腔种植灶。然而尽管卵巢癌的转移倾向为腹腔种植播散，但更多的实体瘤为血行和淋巴转移为主，所述探针无法实现肿瘤病灶和转移灶的全面显像，因此，成像探针的生物相容性、体内循环时间等化学特性亟待改善。

因此，本发明在前期基础上，结合聚乙二醇(Polyethylene glycol，PEG)的修饰，研制了新型且适用于静脉给药的靶向GnRH受体的PEG化的近红外荧光成像探针，能够特异性识别并显像表达GnRH受体的肿瘤病灶及其转移灶。该探针有望在实体瘤的荧光成像和荧光指导手术中发挥良好的应用潜力。

发明内容

本发明提供一种GnRH多肽修饰的聚乙二醇化Rh760成像探针及其制备方法与应用。所述GnRH多肽修饰的聚乙二醇化Rh760成像探针(GnRHa-PEG-Rh760)由GnRH多肽(GnRHa)、FMOC-PEG2000-COOH、近红外荧光染料Rh760偶联而成。

其中，GnRH多肽序列为

D-2-Nal-D-4-Cl-Phe-D-3-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH₂。

GnRH多肽的结构、FMOC-PEG2000-COOH的结构、近红外荧光染料Rh760的结构、以及偶联后的靶向成像探针GnRHa-PEG-Rh760的结构见附图1。

本发明还提供了一种成像探针GnRHa-PEG-Rh760的制备方法，所述方法包括：由GnRH多肽、FMOC-PEG2000-COOH、近红外荧光染料Rh760偶联制备得到所述GnRH多肽修饰的聚乙二醇化Rh760成像探针。

具体地，所述成像探针的制备方法包括：

(1)Rink树脂、氨基酸Fmoc-D-Ala-OH、DCM、DIPEA，进行反应；结束后，封闭反应；