[发明专利]一种酪蛋白-金纳米簇的制备方法及在金霉素检测中应用在审
申请号: | 202110664373.9 | 申请日: | 2021-06-16 |
公开(公告)号: | CN113390843A | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
发明(设计)人: | 付丁伊;曹蕾;袁心语;周梦艳;丁姝姝 | 申请(专利权)人: | 南通大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/31;G01N33/53;G01N1/38 |
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地址: | 226019 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 纳米 制备 方法 金霉素 检测 应用 | ||
本发明公开了一种酪蛋白‑金纳米簇的制备方法及在金霉素检测中应用,具体步骤如下:S1、称量一定量的酪蛋白,加入750μL水溶解,再加入氢氧化钠溶液调节溶液pH,37℃‑90℃水浴加热15‑20分钟,得到溶液A;S2、将氯金酸加入到步骤S1得到的溶液A中,37℃‑90℃水浴加热0‑5小时,得到溶液B;S3、将步骤2得到的溶液B,保存在4℃条件下,得到酪蛋白‑金纳米簇。本发明的荧光金纳米簇具有独特的光物理特性、制备简单、几乎无毒和优异的生物相容性,检测金霉素方法快速简单、检测灵敏度高,检测限低,是应用于生物和医学领域的理想荧光纳米材料。
技术领域
本发明涉及金纳米簇合成技术领域,具体为一种酪蛋白-金纳米簇的制备方法及在金霉素检测中应用。
背景技术
酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白,既有亲水性氨基酸残基又有疏水性氨基酸残基的两亲性共聚物。对幼儿而言,酪蛋白既是氨基酸的来源,也是钙和磷的来源。同时,酪蛋白具有防治骨质疏松与佝偻病,调节血压,治疗缺铁性贫血、缺镁性神经炎等多种生理功效,还能促进常量元素如钙、镁与微量元素如铁、锌、铜等的高效吸收。酪蛋白具有多种氨基酸,尤其是含有相当多的脯氨酸残基,因而有望成为合成金纳米簇的模板。
金属纳米团簇具有类分子的性质,能够光致荧光,具有稳定性良好,合成条件温和,毒性低、生物相容性高等优点。由于蛋白质含有许多活性位点如硫醇、氨基、羧基和羟基,能聚集和还原金离子,通常以稳定剂和还原剂的形式作用于金属中心,蛋白保护的金属纳米簇在适当配体作用下表现出较强的荧光,而蛋白的二级结构和生物功能一般不会显著改变,蛋白的结构稳定可保证其荧光性能不会因发生聚集而被淬灭。制备形成的金纳米簇具有超小尺寸,荧光强且可调,斯托克斯位移较大,量子效率高,稳定性好等优点,是应用于分析和生物领域的理想荧光材料。
金霉素是一种广谱的四环素类抗生素,对革兰阳性菌和阴性菌均有抑制作用,常用做动物传染性疾病的治疗,同时也作为促进生长剂用于动物饲料中;但使用剂量不当,在动物肉、蛋、奶等食品中的残留造成了严重副作用,如环境污染、细菌产生耐药性等。但是针对金霉素的传统检测方法具有稳定性差、灵敏度低、耗时长等局限性,因而急需开发一种快捷高效的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种酪蛋白-金纳米簇的制备方法及在金霉素检测中应用,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种酪蛋白-金纳米簇的制备方法,具体步骤如下:
S1、称量一定量的酪蛋白,加入750μL水溶解,再加入氢氧化钠溶液调节溶液pH,37℃-90℃水浴加热15-20分钟,得到溶液A;
S2、将氯金酸加入到步骤S1得到的溶液A中,37℃-90℃水浴加热0-5小时,得到溶液B;
S3、将步骤2得到的溶液B,保存在4℃条件下,得到酪蛋白-金纳米簇。
优选的,所述S1中,酪蛋白浓度为30mg ml-1。
优选的,所述S1中,加热温度为70℃,加热时间为20分钟。
优选的,所述S2中,加热温度为70℃,加热时间为3小时。
优选的,一种酪蛋白保护金纳米簇在金霉素检测中的应用,用磷酸缓冲液稀释酪蛋白-金纳米簇,加入不同浓度的金霉素混合均匀,并在室温条件下孵育,激发波长条件下,随着金霉素浓度的逐渐增加,酪蛋白-金纳米簇的荧光强度逐渐增强,实现比率型检测。
优选的,在室温条件下孵育5分钟,在360nm激发波长条件下,实现检测。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
(1)本发明以酪蛋白为模板,采用一步合成法在水溶液中制备酪蛋白-金纳米簇,具有独特的光物理特性、几乎无毒且具有优异的生物相容性。
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