[发明专利]增强肝细胞功能性的培养方法及所使用的肝细胞培养液

权利要求书

1.一种增强肝细胞功能性的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

预处理目标肝细胞，使得所述目标肝细胞的贴壁生长密度达到90%；

配置肝细胞培养液，用于诱导目标肝细胞增强表达功能性基因；

利用所述肝细胞培养液对所述预处理目标细胞进行预设天数的连续培养，所述预设天数为5~6天；

其中，所述肝细胞培养液包括如下组分：

地塞米松，终浓度为1~20μM；

姜黄素，终浓度为1~20μM；

DMSO，终浓度为0.1ml/100ml；

余量为基础培养基，所述基础培养基选自DMEM/F12细胞培养基、F12细胞培养基和William's E细胞培养基中的一种；

其中，所述功能性基因包括以下至少一个：

ALB基因、UGT1A9基因、AAT基因、CYP34A基因。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述目标肝细胞来自C3A肝癌细胞、HepG2肝癌细胞或HepaRG人肝细胞株。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述利用所述肝细胞培养液对所述预处理目标细胞进行预设天数的连续培养，包括：

在预设天数之内，每隔24小时更换所述肝细胞培养液，并且保持所述目标肝细胞的贴壁生长密度维持在90%以上。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述更换所述肝细胞培养液，包括：

加入新鲜的所述肝细胞培养液之前，弃去培养容器中的上清液，用缓冲液洗涤两次。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述预处理目标肝细胞，包括：

将贴壁培养的目标肝细胞依次进行消化、重悬和接种至新的贴壁培养容器，直至所述目标肝细胞的贴壁生长密度达到90%。

6.如权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述地塞米松和姜黄素的总质量与DMSO的体积比不超过1：1000。