[发明专利]一种科研用抗体的化学转染试剂及其制备方法有效
申请号: | 202110659404.1 | 申请日: | 2021-06-15 |
公开(公告)号: | CN113355361B | 公开(公告)日: | 2022-11-29 |
发明(设计)人: | 谭舟 | 申请(专利权)人: | 浙江欧赛思生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;C08G73/02 |
代理公司: | 杭州伍博专利代理事务所(普通合伙) 33309 | 代理人: | 宋锦宏 |
地址: | 313100 浙江省湖州市长兴县开发区太*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 科研 抗体 化学 转染 试剂 及其 制备 方法 | ||
本发明公开了一种科研用抗体的化学转染试剂及其制备方法。它包括聚合物和工作液,聚合物和工作液的质量和体积比为1g~15g:100ml~150ml,聚合物按质量和体积比计,包括以下配方原料:100ml~150ml的双蒸水、10ml~30ml的硫酸、1ml~10ml的氮丙啶、0.1g~0.5g的引发剂Vazo50、30ml~80ml的二乙醇胺、5g~10g的4‑二甲胺吡啶,工作液按体积比计,包括以下配方原料:50ml~80ml的生理盐水、35ml~60ml的二甲基亚砜、1ml~5ml的甘油。本发明的有益效果是:提高了聚合物与工作液的混合效果,进而提升了转染试剂的产品质量,提高了转染效率;提高了聚合物与工作液的均匀混合效果;对杯体中的混合液能够进行均匀的加热,加热效果好;使聚合物和工作液能够充分的混合溶解;控制方便,自动化程度高,工作效率高。
技术领域
本发明涉及转染试剂相关技术领域,尤其是指一种科研用抗体的化学转染试剂及其制备方法。
背景技术
基因转染技术能够将特定的遗传信息传递到真核细胞中,这种技术不但革新了生物学和医学中许多基本问题的研究,也推动了诊断和治疗方面的分子技术发展,并使基因治疗成为可能。基因转染已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等研究。
基因转染时需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到宿主细胞内,而现有的转染试剂制作工艺所制作出来的转染试剂转染效率低下,很容易出现宿主细胞死亡的现象。
发明内容
本发明是为了克服现有技术中转染试剂的转染效率低的不足,提供了一种能够提高转染效率的科研用抗体的化学转染试剂及其制备方法。
为了实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种科研用抗体的化学转染试剂,包括聚合物和工作液,所述聚合物和工作液的质量和体积比为1g~15g:100ml~150ml,所述聚合物按质量和体积比计,包括以下配方原料:100ml~150ml的双蒸水、10ml~30ml的硫酸、1ml ~10ml的氮丙啶、0.1g~0.5g的引发剂Vazo50、30ml~80ml的二乙醇胺、5g~10g的4-二甲胺吡啶,所述工作液按体积比计,包括以下配方原料:50ml~80ml的生理盐水、35ml~60ml的二甲基亚砜、1ml~5ml的甘油。
通过各原料组分之间的协同配合促进,使得制作出来的化学转染试剂具有良好转染性能,提高了转染效率。
本发明还提供了一种科研用抗体的化学转染试剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一,在反应容器一中加入双蒸水和硫酸,搅拌后加热至80℃~90℃,之后依次加入氮丙啶、引发剂Vazo50、二乙醇胺和4-二甲胺吡啶,控制温度恒定为80℃~90℃,反应时间为4~10h,反应结束后将得到的产物冷却至室温,再对其进行减压浓缩,之后采用柱层析提纯,得到聚合物;
步骤二,在反应容器二中加入生理盐水、二甲基亚砜和甘油,混合搅拌5min~10min,得到工作液;
步骤三,将得到的聚合物和工作液按质量和体积比倒入反应设备中进行搅拌混合并在50℃~60℃的水浴中进行加热溶解,即可得到该染试剂。
各原料组分通过此方法得到的阳离子聚合物转染试剂其转染效率高、细胞毒性低、使用简便。
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