[发明专利]一种抗LAP单克隆抗体、其抗原结合片段及其应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，提供了一种抗LAP单克隆抗体或其抗原结合片段，包括重链可变区HCDR1、HCDR2、HCDR3和轻链可变区LCDR1、LCDR2、LCDR3。本发明提供的抗LAP单克隆抗体从源头抑制TGFβ1的释放，删除抑制性T细胞，提高肿瘤免疫响应，可与多种免疫治疗药物联合应用，可扩展到更多类型的癌症、自身免疫性疾病以及纤维化疾病，临床需求巨大，市场潜力巨大；癌症选自包括非小细胞肺癌、结直肠癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌、黑色素瘤或神经胶质瘤；纤维化疾病包括肺纤维化或肝纤维化；自身免疫疾病选自系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、多发性硬化症、皮肌炎、多肌炎、血管炎或干燥症。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种抗LAP单克隆抗体、其抗原结合片段及其应用。

背景技术

癌症免疫治疗是利用人体的免疫机制，通过主动或被动的方法来增强患者的免疫功能，以达到杀伤肿瘤细胞的目的，目前癌症免疫检查点抑制剂治疗取得了突破性进展和持久的癌症免疫治疗响应，并在逐渐成为日益增加的癌症治疗的一线标准治疗方式。但仍有大量的肿瘤病人对此治疗方式不响应，表明存在有其他的机制阻止免疫系统靶向消除肿瘤细胞。

目前在对肿瘤病人的临床数据的回顾性分析中，发现TGFβ信号通路的激活是免疫治疗不响应的关键因素，对抗PD-1抗体治疗不响应的黑色素瘤病人的治疗前肿瘤活检样品进行转录图谱分析，结果显示存在大量丰富的TGFβ相关的信号通路，另外对恶性膀胱癌病人肿瘤样品进行相同的分析，结果也显示TGFβ相关的转录标签与抗PD-1治疗缺乏响应存在明显的相关性，尤其是在CD8 T细胞不能进入肿瘤内部的肿瘤中更明显，这些临床数据在临床前鼠同种异源肿瘤模型中也得到验证，在对PD-L1治疗低或无响应的EMT-6乳腺癌模型中，PD-L1抑制剂联合TGFβ抑制子治疗导致肿瘤响应比例显著增加，此联合治疗的抗肿瘤活性与癌症相关成纤维和激活的浸润到肿瘤内部CD8的表型相关。在小鼠结肠癌模型中，联合PD-L1抑制剂和TGFβI型受体的小分子抑制剂ALK5治疗也产生相同的效果。总而言之，临床来源的相关证据以及临床前有效的抑瘤结果指出，在增加临床癌症免疫治疗响应比例的临床药物开发中，抑制TGF信号通路的药物开发有着巨大的希望。

哺乳动物体内存在TGFβ1，TGFβ2，TGFβ3三种形式的TGFβ生长因子，每个生长因子各由不同的基因编码，但都通过相同的TGFβ受体复合物进行信号传递，这三种异构体均以潜伏的无活性蛋白复合体形式在体内表达。在体内，潜伏的TGFβ1和TGFβ3被αν整合蛋白激活，其通过作用于LAP(Latency-associated peptide)上的RGD区域触发构象变化，从而释放出活性的TGFβ1和TGFβ3因子，TGFβ1也可以以蛋白酶水解LAP的方式从潜伏复合物中释放出。TGFβ1以前体蛋白形式在体内合成，其成熟的具有生物活性的TGFβ1细胞因子与LAP蛋白质笼子形成小复合物，后者通过二硫键与5种不同的锚定蛋白(GARP、LRRC33、LTBP1、LTBP3、LTBP4)形成大复合物，从而将TGFβ1局限在不同类型的细胞或细胞外基质中。

TGFβ1是一种多功能肽分子，控制和影响多种细胞的增殖、分化、凋亡以及其他的细胞功能。TGFβ1在免疫系统中也发挥重要功能，在不同类型的免疫细胞和不同发育阶段的细胞中起着不同的作用，通常TGFβ1被认为是免疫抑制因子。大多数免疫细胞均分泌TGFβ1，调节性T细胞通过释放TGFβ1抑制其他T细胞的活性，例如TGFβ1抑制IL-1/IL-2依赖性的激活T细胞的增殖；抑制静息辅助T细胞和细胞毒性T细胞等的激活；抑制IFN-γ、TNF-α等不同细胞因子的分泌和活性，同时可通过减少细胞因子受体的表达水平下调免疫细胞活性，TGFβ1在巨噬细胞和单核细胞上表现出抑制功能。