[发明专利]非洲猪瘟病毒D205R和D345L基因的应用

说明书

本发明公开了非洲猪瘟病毒D205R和D345L基因的应用,具体为非洲猪瘟病毒D205R和D345L基因在制备非洲猪瘟病毒疫苗中的应用；非洲猪瘟病毒D205R和D345L基因能够显著抑制病毒感染诱导的干扰素表达，并抑制干扰素刺激基因ISGs的表达，通过双荧光素酶报告基因系统检测发现，经对比，表达D205R和D345L基因能够抑制仙台病毒诱导的干扰素启动子活性和干扰素刺激应答元件(ISRE)活性。通过荧光定量PCR试验，发现D205R和D345L基因的表达能够显著抑制仙台病毒感染诱导的Ⅰ型干扰素IFNβ的mRNA表达水平，以及抑制发挥抗病毒功能的干扰素刺激基因ISG15和OASL的表达水平。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及两种病毒蛋白的功能鉴定及其在制备基因缺失疫苗中的应用，主要涉及非洲猪瘟病毒D205R和D345L蛋白的功能鉴定及其在制备非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗中的应用。

背景技术

非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)是一种DNA病毒，是非洲猪瘟病毒科，非洲猪瘟病毒属的唯一成员。非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由ASFV引起的猪烈性传染病，能造成感染家猪100％死亡。ASF最初于20世纪20年代在肯尼亚爆发，随后在南非和东非地区迅速蔓延，并在1998年被引入印度洋地区。1957年首次在非洲以外的地区(葡萄牙)爆发，随后在欧洲的一些国家都报道了ASF疫情。2007年，随着ASF传入高加索地区的格鲁吉亚，ASF进一步跨大陆传播，并逐渐演变为地方流行病。ASF在国与国之间广泛的传播，严重影响了流行地区的经济发展。2018年8月3日在中国沈阳发现首例ASF病例，并在接下来几个月内席卷了全国，在我国大部分地区蔓延开来。至今为止，我国的非洲猪瘟防控形势依然复杂严峻。大家都期待能研制出安全有效的非洲猪瘟疫苗。

ASFV是一种结构复杂的双股线状DNA病毒，病毒结构由外向内依次为外囊膜、衣壳、内囊膜、核衣壳以及拟核，病毒粒子呈二十面体对称[9]。ASFV的基因组长度在170-193kb之间，基因组呈线状，由中间的保守区、两侧终端的可变区组成，多基因家族位于两侧的可变区。基因组末端的重复序列以反向互补不完全碱基配对的发夹环共价闭合。病毒基因组编码151到167个开放性阅读框(Open reading frame，ORF)，基因组长度及编码蛋白数量取决于末端区编码的多基因家族的数量。目前ASFV能够编码的蛋白数量尚未解析完全，而已知ASFV编码蛋白的功能也尚未研究清楚。