[发明专利]小分子化合物MLN4924在促进外泌体分泌中的应用

说明书

本发明公开了小分子化合物MLN4924在促进外泌体分泌中的应用。本发明研究发现MLN4924能够显著增加细胞的外泌体分泌，但不影响细胞的增殖和凋亡，也没有改变外泌体的形态和大小分布。体内研究发现MLN4924剂量依赖性地增加了实验动物血清内外泌体的数量，表明MLN4924对外泌体分泌的促进在体外和体内均有效应。MLN4924能用于提高外泌体的产量具有重要的生产和应用价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及小分子化合物MLN4924在促进外泌体分泌中的应用。

背景技术

外泌体是各种活细胞分泌的直径介于30-150纳米具有脂质双分子层结构的小囊泡。大量的研究证据表明，外泌体本身或者作为药物载体都具有良好的治疗效应。间充质干细胞(MSCs)来源的外泌体通过传递其成分包括miRNAs和蛋白质如白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)，抑制促炎细胞因子的表达，增强细胞外基质重塑来发挥抗炎作用，促进组织再生(Teng X,Chen L,Chen W,et al.Mesenchymal stem cell-derivedexosomes improve the microenvironment of infarcted myocardium contributing toangiogenesis and anti-inflammation.Cellular Physiology and Biochemistry,2015,37(6):2415-2424.)；树突状细胞(DCs)来源的外泌体通过表达主要组织相容性复合体MHC-I、MHC-Ⅱ和共刺激因子，如CD86，可作为有效的抗癌疫苗(Théry C,Regnault A,Garin J,et al.Molecular characterization of dendritic cell-derived exosomes:selectiveaccumulation of the heat shock protein hsc73.The Journal of Cell Biology,1999,147(3):599-610.)；未成熟树突状细胞来源的外泌体荷载阿霉素对乳腺癌小鼠有显著治疗效应(Tian Y,Li S,Song J,et al.A doxorubicin delivery platform usingengineered natural membrane vesicle exosomes for targeted tumortherapy.Biomaterials,2014,35(7):2383-2390.)；间充质干细胞(MSCs)可以荷载Kras^+G12DsiRNA在多种动物模型中用于治疗胰腺癌(Kamerkar S,LeBleu V S,Sugimoto H,etal.Exosomes facilitate therapeutic targeting of oncogenic KRAS in pancreaticcancer.Nature,2017,546(7659):498-503.)。

然而，实际提取过程中，单位体积的培养基中外泌体的获取量较低，其工业化生产的材料耗费与时间成本过高(Lv L,Wu W,Feng Y,et al.Therapeutic application ofextracellular vesicles in kidney disease:promises and challenges.Journal ofCellular And Molecular Medicine,2018,22(2):728-737.)，因此，目前学界亟需有效的外泌体大规模生产方法。