[发明专利]一种新型的杂交捕获方法及其装置

说明书

本发明提供了一种新型的杂交捕获方法及其装置。揭示了一种新型杂交捕获装置，其包括相配合的反应池组件、膜组件和气控组件。所述反应池组件包括加样池，多列径向排列的反应池组及废液池；所述膜组件为具有延展性的膜；所述气控组件包括内圈气控通道和外圈气控通道。本发明也揭示了利用所述装置进行杂交捕获的方法。本发明的装置通过上中下层的巧妙组合、以及各个反应池的有序排列，高效便捷地进行多通量或高通量的杂交捕获实验，保持理想的灵敏度、特异性和准确性。本发明的方法将原本在酶标板、磁珠等载体上进行的杂交捕获技术转移到一体化装置中，实现了杂交捕获技术的小型化、自动化，且可以同时检测多种靶标核酸或多个样本。

技术领域

本发明属于检测装置领域，更具体地，本发明涉及一种新型的杂交捕获方法及其装置。

背景技术

杂交捕获技术是一种利用抗体检测靶核酸的技术。其原理为靶DNA与RNA探针杂交(或靶RNA与DNA探针杂交)形成DNA-RNA杂合体，此杂合体作为抗原可被抗DNA-RNA杂合体抗体识别并捕获，进而进行检测。杂交捕获技术不涉及核酸的提取、逆转录和扩增等程序，无需昂贵的PCR扩增仪和单独的核酸扩增实验室，对操作人员的要求也相应的较低。

通常，杂交捕获技术在酶标板、磁珠等经典的固相载体上实施。杂交捕获技术与酶联免疫吸附技术具有区别，比如其核酸变性和杂交的步骤涉及到温度的变化，实际操作中所需考虑的因素和可能面临的问题也不同。

对于杂交捕获技术，目前面临的问题是通量上难以提高、操作便利性有待提高，因此本领域亟待进行此类的改进。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型的杂交捕获方法及其装置。

在本发明的第一方面，提供一种高通量的杂交捕获方法，所述方法包括：

(1)提供高通量杂交捕获的装置，其包括相配合的反应池组件、膜组件和气控组件；所述反应池组件包括：加样池，多列径向排列的反应池组及废液池，每列反应池组包括反应池一、反应池二、反应池三；加样池、反应池一及反应池二以连通槽串联连通；反应池二与反应池三之间、反应池三与废液池之间存在间隔区；所述膜组件为具有延展性(弹性)的膜，位于反应池组件与气控组件之间；所述气控组件包括内圈气控通道和外圈气控通道，该组件与膜组件接触后能形成与内圈气控通道和外圈气控通道相配合的气控阀区；每列径向排列的反应池组中，反应池二与反应池三之间的间隔区对应内圈气控通道相应的气控阀区，反应池三与废液池之间的间隔区对应外圈气控通道相应的气控阀区；通过控制气控阀区的膜组件形变而控制间隔区的液流，所述内圈气控通道或外圈气控通道充气后膜组件正向形变(膨胀)、抽气后膜组件负向形变(收缩)；

(2)在所述反应池三中包被抗DNA-RNA杂合体的捕获抗体；在所述反应池二中加入核酸探针，当待测样品为DNA时该核酸探针为RNA探针、当待测样品为RNA时该核酸探针为DNA探针；

(3)将待测样品加入到加样池，从加样池引入到反应池一；所述待测样品为经核酸解链的样品，或在反应池一进行核酸解链；

(4)将内圈气控通道充气、气控阀区膜组件正向形变、反应池二与反应池三之间的间隔区封闭；将待测样品引入反应池二，核酸探针与样品中相应核酸进行杂交反应，形成DNA-RNA杂合体；

(5)将内圈气控通道抽气、气控阀区膜组件负向形变、反应池二与反应池三之间的间隔区打开；将外圈气控通道充气、气控阀区膜组件正向形变、反应池三与废液池之间的间隔区封闭；将杂交反应后的产物引入到反应池三中，以抗DNA-RNA杂合体的捕获抗体捕获DNA-RNA杂合体；

(6)将所述外圈气控通道抽气、气控阀区膜组件负向形变、反应池三和废液池之间的间隔区打开；将捕获反应后的废液排入废液池；

(7)检测捕获的DNA-RNA杂合体的存在情况或存在量。