[发明专利]血浆外泌体中环状RNA在IPF诊断治疗中的应用

说明书

本发明公开了血浆外泌体中环状RNA在IPF诊断治疗中的应用。与IPF相关的外泌体环状RNA标志物或其组合，包括下列中的任意一种或多种：hsa_circ_0044226，hsa_circ_0004099，hsa_circ_0008898。检测所述的与IPF相关的外泌体环状RNA标志物的试剂在制备IPF诊断或辅助诊断试剂中的应用。发明人通过高通量测序和定量PCR在190例患者中分析发现血浆中外泌体内的3种环状RNA可以有效地将IPF和非IPF患者区分开，ROC曲线下面积均大于0.887，可作为检测标志物应用于IPF的诊断。

技术领域

本发明属于医学诊断领域，涉及血浆外泌体中环状RNA在IPF诊断治疗中的应用。

背景技术

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是一种进行性发展，致死性的，病因不明的间质性肺疾病。它以胶原过度沉积为病理特征，并且形成在肺间质中不断扩展的纤维化灶。IPF的主要效应细胞是成纤维细胞和肌成纤维细胞。IPF的致病因素有很多：遗传、吸烟和年龄、病毒和细菌感染、胃食管反流病、木尘或金属粉尘、药物等都有可能造成IPF。现有的抗肺纤维化上市药物有吡非尼酮和尼达尼布，但二者均不能有效地治疗肺纤维化。IPF多发于老年人和男性群体，中位生存期2-3年，且发病率和死亡率随年龄增长而增长。目前IPF诊断主要依赖于影像学检查，早期难以有效地鉴定其病理特征并确诊，并且对于IPF稳定期和IPF急性加重患者缺乏有效的鉴别方法。因此亟待开放相关鉴别技术。

外泌体具有双层膜结构，内含复杂RNA和蛋白质。外泌体存在于多种体液中，机体几乎所有的细胞都能产生外泌体。外泌体能够参与细胞间通讯，外泌体中含有的脂质、蛋白质等物质能通过运输到特定的靶细胞发挥调控作用。此外，外泌体参与免疫应答，例如NK细胞分泌的外泌体激活免疫细胞参与机体的免疫应答，巨噬细胞分泌的外泌体诱导免疫细胞的聚集等。在本发明中，我们研发了一种从病人血浆外泌体中提取环状RNA，通过高通量测序和定量PCR技术鉴定了一组与IPF相关的血浆外泌体来源的环状RNA。

发明内容

本发明的目的是提供与IPF相关的血浆外泌体环状RNA标志物。

本发明的另一目的是提供所述标志物的应用。

本发明的又一目的是提供检测所述标志物的试剂及其应用。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：

与IPF相关的外泌体环状RNA标志物，其特征在于选自下列环状RNA中的任意一种或多种：hsa_circ_0044226，hsa_circ_0004099，hsa_circ_0008898。

作为本发明的一种优选，所述的标志物选自hsa_circ_0044226，hsa_circ_0004099，hsa_circ_0008898中任意两种或三种的组合。

本发明所述的外泌体环状RNA标志物在制备IPF诊断试剂中的应用。

hsa_circ_0044226在制备区分IPF稳定期和急性加重期的试剂中的应用。

定量检测本发明所述的外泌体内环状RNA标志物的试剂。

作为本发明的一种优选，所述的定量检测所述的外泌体内环状RNA标志物的试剂为检测所述外泌体环状RNA标志物的引物、探针或基因芯片。

作为本发明的进一步优选，检测hsa_circ_0044226的引物如SEQ ID NO.1和SEQID NO.2所示；检测hsa_circ_0004099的引物如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；检测hsa_circ_0008898的引物如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

本发明所述的检测试剂在制备IPF诊断试剂中的应用。